[发明专利]一种复合酶法提取南极磷虾虾青素的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种从水产动物中提取虾青素的方法，具体涉及一种复合酶法提取南极磷虾虾青素的方法。

背景技术

南极磷虾(Antarctic krill)是一种似虾的无脊椎甲壳纲动物，通常是指南极大磷虾(Euphausia superba Dana,1852)，形体较小、体长一般在4～6cm，生物储藏量巨大，据统计在3.4×10⁸t至5.4×10⁸t之间。南极磷虾本身不仅蕴含丰富的蛋白质、矿质元素及多种不饱和脂肪酸，如EPA、DHA等，还含有多种活性成分，如酶类、甲壳素和虾青素等，这些物质有利于南极磷虾高附加值产品的开发，可极大提高南极磷虾资源的综合利用率。

虾青素(Astaxanthin)，属酮式类胡萝卜素，是一种萜烯类不饱和化合物，化学名称为3,3'-二羟基-4,4'-二酮基-β,β'-胡萝卜素，具有多种生理学活性，包括抗氧化性、抗炎性与提高免疫力、预防心血管疾病及抗肿瘤等作用，因此在食品、医药及化妆品等行业具有重要作用。目前虾青素的来源主要有人工合成与天然生物提取等2种方式。化学合成法虽然生产成本较低、产量高，但人体对化学合成的虾青素不但无用而且有报道可能致癌。世界各国对化学合成虾青素的管理也越来越严，如美国食品与药物管理局(FDA)已禁止化学合成的虾青素进入人用市场。而天然虾青素的着色能力和生物效果，在同样浓度下要比合成虾青素高得多，也越来越受到人们青睐，因此开发天然虾青素来源已成为虾青素研究的一项重要课题。

天然虾青素要有3个来源：一是微生物来源，如红法夫酵母(Phafia Rhodozyma)，这种酵母通过发酵糖类产生虾青素，但培养条件严苛，因此尚未得到广泛应用。二是天然藻源，天然虾青素在藻类植物中分布广泛，其中雨生红球藻(Haematococcus pluvialis)近年来被公认为虾青素的最好来源，但藻类生长周期长，一定程度上限制了藻类中虾青素的规模化生存。三是各种水产动物，特别是水产甲壳类动物如各种虾蟹，由于我国存在大量的水产加工废弃物，因此可作为提取虾青素的有效来源。

南极磷虾作为虾青素的一种重要的天然来源，含有游离与酯化两种类型的虾青素，主要分布在南极磷虾的外壳上。目前从水产动物中提取虾青素的方法主要有有机溶剂法、超临界萃取法、及其他新技术辅助法如超声波、超高压等。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种提取效率高、提取时间短、提取综合成本低的复合酶法提取南极磷虾虾青素的方法。

本发明上述所要解决的技术问题是通过以下技术方案来实现的：

一种复合酶法提取南极磷虾虾青素的方法，包括如下步骤：

(1)将冷冻南极磷虾搅碎，得到湿虾鲜样；

(2)加入蒸馏水，并添加复合酶得到南极磷虾复合酶溶液；

(3)将所述南极磷虾复合酶溶液进行酶解，得到南极磷虾酶解液；

(4)将所述南极磷虾酶解液冰水浴冷却后，进行低温离心，得到离心沉淀物；

(5)将所述离心沉淀物用有机溶剂提取后离心，得到南极磷虾虾青素提取液。

在上述利用复合酶法提取南极磷虾虾青素的方法中：

步骤(2)中所述的复合酶由比例为3：2的Alcalase碱性蛋白酶和木瓜蛋白酶复合组成。

步骤(2)中所述南极磷虾复合酶溶液中水料比(V：m，mL：g)为4：1～5：1，酶添加量为1.5％～2.0％。

步骤(3)中所述酶解条件为：酶解时间2.0～2.5h，酶解温度50～55℃。

步骤(4)中所述酶解液冰水浴冷却时间为20～30min，8000～10000r/min低温离心20～25min。

步骤(5)中所述提取剂为无水乙醇，提取条件为：料液比(m：V，g：mL)1：4～1：5，振荡时间5～10min，振荡提取2次。

步骤(5)中所述提取后离心条件为4000～5000r/min离心5～10min。

本发明具有如下优点：本发明采用复合酶提取南极磷虾虾青素的方法，由于常见用于提取虾青素的南极磷虾个体较小，主要以冻结成块的“虾砖”为主，而虾青素主要存在于虾头与虾壳中，因此本发明采用复合酶酶解技术处理原料虾，可有效的通过蛋白酶解去除虾肉蛋白，相对于单独酶解作用，在应用本发明时提取南极磷虾虾青素事可显著提高其提取量；；同时机械振荡提取时间短，且为常温提取，对虾青素破坏作用小，更好地提高了虾青素的提取效率、保护了虾青素的活性。

具体实施方式

实施例1