[发明专利]一种超声提取的川白芷多糖及制备方法和应用

说明书

技术领域

本发明属于生物医药技术领域，具体涉及一种超声提取的川白芷多糖及制备方法和应用。

背景技术

药材白芷为伞形科植物白芷Angelica dahurica(Fisch.exHoffm)Benth.et Hook.f.或杭白芷Angelica dahurica(Fisch.exHoffm)Benth.et Hook.f.var.formosana(Boiss)Shan et Yuan的干燥根。白芷味辛，性温，归胃、大肠、肺经。具有解表散寒，祛风止痛，宣通鼻窍，燥湿止带，消肿排脓的作用，用于感冒头痛，眉棱骨痛，鼻塞流涕，鼻鼽，鼻渊，牙痛，带下，疮疡肿痛。

白芷是卫生部公布药食两用的87种中药材之一，也是我国常用的大宗药材。按产地分为川、杭、祁、禹白芷四大商品。其中产于四川的白芷则称川白芷，是著名的川产道地药材，产量约占全国商品白芷的70％。川白芷以四川遂宁出产的形优、质坚、粉多香浓、色白细腻、横切片成“菊花芯形”的川白芷品质最佳。白芷富含多种化学成分，现代研究表明，白芷的脂溶性化学成分主要为香豆素类，含量为0.211％～1.221％，其水溶性成分有棕榈酸、豆甾醇、β-谷甾醇、β-胡萝卜苷(β-daucosterin)等。白芷还富含多种多糖。

多糖广泛存在于动、植物和微生物(真菌和细菌)中，常与蛋白质和多聚核苷酸相连，是生命活动中必不可少的生物大分子，在细胞吸附、细胞与细胞信息交流、免疫系统分子识别方面扮演着重要的作用。目前多糖已成为天然药物及保健品研发中的重要组成部分。植物多糖具有多种生物活性，如抗氧化、抗肿瘤、抗病毒、降血糖血脂、抗衰老、抗炎、抗辖射、免疫调节等。

与传统提取方法相比，采用超声法提取多糖处理简单安全，省时，提取效率高。但超声波强烈的机械剪切作用，可能会致多糖分子结构的改变，使其生物活性丧失。

目前对于白芷多糖的研究尚不够深入。仅个别学者对杭白芷多糖的提取以及抗氧化和增强动物皮肤组织免疫功能进行过分析，且尚未开展过超声法提取的白芷多糖的结构和活性研究。

发明内容

本发明的目的之一在于针对上述问题，提供一种超声提取的川白芷多糖。

本发明的目的之二在于提供一种超声提取的川白芷多糖的制备方法。

本发明的目的之三在于提供一种超声提取的川白芷多糖的应用。

为实现上述目的，本发明采用的技术方案如下：

本发明所述的一种超声提取的川白芷多糖，该川白芷多糖同时存在α构型和β构型多糖链接方式，其表观分子量为170.07kDa；所述川白芷多糖由川白芷药材经超声提取、醇沉除杂、去蛋白去盐后，再经DEAE-琼脂糖凝胶FF柱和琼脂糖凝胶6FF凝胶柱层析分离而得。

本发明所述的川白芷多糖的制备方法，具体包括以下步骤：

A：脱脂脱色素：将川白芷药材洗净烘干粉碎，得粉末；将所述粉末先加入石油醚脱脂后，再加入高浓度乙醇溶液脱除部分色素及低聚糖；

B：提取：将脱脂脱色素后的粉末加水超声提取后，离心，收集上清液，浓缩，得浓缩液；

C：醇沉除杂：将所述浓缩液醇沉除去水溶性杂质后得到川白芷粗多糖；

D：去蛋白：将所述川白芷粗多糖采用酶+Sevag结合法去除蛋白；

E：透析去盐：将所述去除蛋白后的川白芷粗多糖采用透析法去除使无机盐和小分子物质，得去盐川白芷多糖；

F：将所述去盐川白芷多糖进行DEAE-琼脂糖凝胶FF柱层析，收集并合并第三个洗脱峰的收集液，浓缩，透析，冻干；

G：将步骤F冻干后的川白芷多糖进行琼脂糖凝胶6FF凝胶柱层析，收集并合并主峰的洗脱液，浓缩，透析，冻干，即得。

进一步地，所述步骤A中，将川白芷药材洗净，于40-50℃烘干，粉碎，过40目筛，得川白芷粉末；取所述川白芷粉末加入石油醚加热回流脱脂4h，过滤，滤渣于40-50℃烘干后，再加入80％乙醇加热回流提取4h，过滤，滤渣挥干乙醇后粉碎，于40-50℃烘干，备用；所述石油醚的用量按每克川白芷粉末计为2-4mL，所述80％乙醇的用量按每克川白芷粉末计为2mL。

进一步地，所述步骤B中加水量以每克脱脂脱色素后的粉末计为2-6mL，提取次数为1-4次，提取时间为0.5-2h。