[发明专利]有机磷半抗原和宽谱多特异性抗原、抗体及其制备方法和应用有效
| 申请号： | 201710424121.2 | 申请日： | 2017-06-07 |
| 公开（公告）号： | CN107337690B | 公开（公告）日： | 2019-12-17 |
| 发明（设计）人： | 刘辉;熊波;张燕;刘辉;朱小钿;韩振亚;陈磊;谢庄擎;陈启镌;梁祖培;苏焕斌;邱国栋;罗永潮;叶为果;陈志波;杨锡伦;吴伟峰;潘振朝;赵丹霞 | 申请（专利权）人： | 广东产品质量监督检验研究院 |
| 主分类号： | C07F9/18 | 分类号： | C07F9/18;C07F9/17;C07K14/765;C07K14/77;C07K14/795;G01N33/566;G01N33/535 |
| 代理公司： | 44102 广州粤高专利商标代理有限公司 | 代理人： | 任重 |
| 地址： | 510330 广东省*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 有机磷 半抗原 宽谱多 特异性 抗原 抗体 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种有机磷宽谱多特异性抗原，其特征在于，其具有式(Ⅲ)所示的结构：
2.权利要求1所述有机磷宽谱多特异性抗原的制备方法，其特征在于，是采用活泼酯法将式(Ⅰ)所示有机磷半抗原Ⅰ和载体蛋白先进行偶联，然后将偶联后的产物继续通过活泼酯化法与式(Ⅱ)所示有机磷半抗原Ⅱ进行偶联，制备获得有机磷宽谱多特异性抗原，
3.根据权利要求2所述有机磷宽谱多特异性抗原的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1.将式(Ⅰ)所示有机磷半抗原Ⅰ溶于DMF中，形成混合溶液，然后加入EDC和NHS于室温下搅拌进行反应，待反应结束后，将反应液加入到载体蛋白的磷酸盐缓冲溶液中，于室温下继续反应，反应结束后，将反应液于室温下透析，即制得有机磷完全抗原Ⅰ；
S2.将式(Ⅱ)所示有机磷半抗原Ⅱ溶于DMF中，形成混合溶液，然后加入EDC和NHS，于室温下搅拌进行反应；
S3.将步骤S1制得的有机磷抗原Ⅰ溶于DMF溶液中，然后加入步骤S2制备的反应液，于室温下进行反应，待反应结束后，将反应液进行透析，即制得所述有机磷宽谱多特异性抗原。
4.根据权利要求3所述有机磷宽谱多特异性抗原的制备方法，其特征在于，步骤S1所述有机磷半抗原Ⅰ与载体蛋白的偶联比为20:1；
步骤S1所述有机磷半抗原Ⅰ与EDC和NHS的反应时间为8～24h；
步骤S1所述有机磷半抗原Ⅰ与载体蛋白的反应时间为6～24h；
步骤S2所述反应时间为8～12h；
步骤S3所述有机磷半抗原Ⅱ与有机磷半抗原Ⅰ的质量比为13.5:1；
步骤S3所述反应时间为6～8h；
所述DMF、EDC和NHS的质量比按照10:2:1确定。
5.权利要求1所述有机磷宽谱多特异性抗原、采用权利要求2～4任一项所述有机磷宽谱多特异性抗原制备得到的抗体在检测有机磷农药中的应用。
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