[发明专利]一种水生生物源交联胶原蛋白复合多层医用敷料

权利要求书

1.一种水生生物源交联胶原蛋白复合多层医用敷料，其特征在于，所述的敷料的制备方法如下：

1）外层壳聚糖膜的制备：

将脱乙酰度不小于80%的壳聚糖配制成质量分数为1%–20%的醋酸溶液，真空脱泡后，于50℃真空干燥制成厚度为2mm的膜；

2）内、外层点胶复合：

在步骤1）制备的外层壳聚糖膜的一侧涂布聚丙烯酸酯类生物胶，使改性胶原蛋白海绵和外层壳聚糖膜进行复合制成内外复合层；

3）复合多层敷料的制备：

在内外复合层上贴附上基布层，灭菌后制成复合多层敷料；

所述的改性胶原蛋白海绵的制备步骤如下：

1）高纯度高活性医用胶原蛋白的制备：

将鱼皮用刀片刮去鱼鳞、残肉和脂肪，洗净后切成小块；鱼皮经超高压处理后浸泡于0.5%–10%的Triton X-100的磷酸缓冲液中，置于振荡器上震荡12–48h，60–200rpm，4℃，在蒸馏水中震荡漂洗，再将鱼皮浸泡于1%–5%的SDS磷酸缓冲液中，置于振荡器上震荡12–48h，60–200rpm，4℃，在蒸馏水中震荡漂洗脱除组织中的细胞；加入0.1M NaOH溶液浸泡除去非胶原成分及色素，蒸馏水反复洗至中性；加入正丁醇溶液搅拌去除脂肪，蒸馏水反复洗涤；使用组织捣碎机充分搅碎后，加入含胃蛋白酶的醋酸中进行提取，离心得上清液为胶原蛋白粗提液，再经的NaCl盐析，至溶液中NaCl最终浓度为0.9M，静置后，9,000rpm离心30min,收集沉淀溶于0.5M醋酸中，经二次盐析后的胶原蛋白复溶于0.5M醋酸中，溶液用0.02M的磷酸氢二钠溶液透析至pH≥8进行灭酶，再用蒸馏水透析除盐，直至透析外液用硝酸银溶液检测无氯离子即为透析终点；透析后的胶原蛋白溶液用0.22或0.45μm的板式膜进行除菌，最后用活性炭进行脱色，离心后去除活性炭获得胶原蛋白，低温真空冷冻干燥；

2）内层多孔胶原蛋白海绵的制备：

将步骤1）制备的胶原蛋白溶于0.1M–0.5M的醋酸溶液中，配制成质量百分比浓度为0.5%–1%的胶原蛋白溶液，采用真空脱泡和低温低速离心并用的脱泡方式脱泡，再将处理的溶液零下40℃预冷冻24h–36h，零下38℃冷冻干燥24h–48h制成厚度为3mm的内层多孔胶原蛋白海绵；

3）内层胶原蛋白海绵交联改性：

将步骤2）所制备的内层多孔胶原蛋白海绵进行改性处理，得到改性的内层胶原蛋白海绵；

其中改性处理，其一种方式是将内层多孔胶原蛋白海绵置于真空干燥箱中，在常温下抽真空，然后升温至110℃–130℃，加热脱水1–3d完成改性；

或是将胶原蛋白海绵放入等离子体处理仪的反应腔内，抽真空，待压强至50–200Pa时，在功率为80–120W下，放电处理5–10min完成改性；

或是将胶原蛋白海绵浸泡于化学交联剂进行交联，交联结束后除去残余交联剂后，低温真空冷冻干燥完成改性。

2.如权利要求1所述的水生生物源交联胶原蛋白复合多层医用敷料，其特征在于，所述的低温低速离心，是在4℃，3,000–5,000rpm离心5–10min。

3.如权利要求1所述的水生生物源交联胶原蛋白复合多层医用敷料，其特征在于，所述的化学交联剂，为戊二醛、碳二亚胺盐酸盐/羟基琥珀酰亚胺、京尼平、茶多酚、去甲二氢愈创木二酸或叠氮二苯基磷。

4.如权利要求1所述的水生生物源交联胶原蛋白复合多层医用敷料，其特征在于，所述的基布层为医用无纺布，将无纺布的一侧涂布医用压敏热熔胶，使复合敷料的内外层与基布层复合。