[发明专利]基于变性牛血清蛋白为模板的铜纳米簇的肝素检测方法

权利要求书

1.基于变性牛血清蛋白为模板的铜纳米簇的肝素检测方法，其特征在于，以磷酸缓冲水溶液、铜纳米簇分散体系和待测样品组成肝素检测体系，检测加入待测样品前后的荧光强度变化，对比标准曲线，得到待测样品中肝素的含量，线性方程为ΔF＝164.66798+0.49882x，ΔF为加入待测样品前后的荧光强度变化值，x为肝素浓度，线性范围为2.5ng/mL～250ng/mL，检出限是0.64ng/mL，选择642.02nm处荧光强度进行检测。

2.根据权利要求1所述的基于变性牛血清蛋白为模板的铜纳米簇的肝素检测方法，其特征在于，磷酸缓冲水溶液浓度为10nmol/L，25℃，pH＝7.4。

3.根据权利要求1所述的基于变性牛血清蛋白为模板的铜纳米簇的肝素检测方法，其特征在于，肝素检测体系由2.4mL磷酸缓冲水溶液、铜纳米簇分散体系1.5mL和100μL待测样品组成。

4.根据权利要求1所述的基于变性牛血清蛋白为模板的铜纳米簇的肝素检测方法，其特征在于，肝素检测体系由0.5～3.5mL磷酸缓冲水溶液、铜纳米簇分散体系0.5～3.5mL和100μL待测样品组成，其中磷酸缓冲水溶液和铜纳米簇分散体系的体积之和为4mL。

5.根据权利要求1所述的基于变性牛血清蛋白为模板的铜纳米簇的肝素检测方法，其特征在于，在加入待测样品组成肝素检测体系后，充分反应10—20min后，再进行荧光强度检测。

6.根据权利要求1所述的基于变性牛血清蛋白为模板的铜纳米簇的肝素检测方法，其特征在于，铜纳米簇分散体系为一锅合成法予以制备的基于变性牛血清蛋白为模板的铜纳米簇，在室温20-25摄氏度条件下按照如下步骤进行：向变性的牛血清蛋白水溶液中加入CuCl 2水溶液，充分反应后，加入水合肼，铜纳米簇分布在变性牛血清蛋白基体上，即铜离子与蛋白表面的氨基、羟基功能基团进行配位，在水合肼作用下实现原位还原形成铜纳米簇，其中氯化铜水溶液的配置为称取1.7050g CuCl 2溶于100mL高纯水中，充分溶解后备用；变性牛血清蛋白水溶液的配置为称取牛血清蛋白0.0700～0.1700g，加30mL水溶解，加入NaBH 4 0.0010～0.0060g反应1h，70℃加热10～40min，冷却至室温20—25摄氏度；加入水合肼之前反应时间为10—30min，加入水合肼后反应1～10h，水合肼加入量为0.3～1.0mL，水合肼为水合肼水溶液，其中水合肼的质量百分数为80％。