[发明专利]组织模型的构建方法及应用

权利要求书

1.一种组织模型的构建方法，其特征在于，该方法包括将天然软组织去细胞基质与动物细胞体外共培养得到所述组织模型。

2.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述天然软组织去细胞基质通过预处理，消毒，脱脂，酶处理，去细胞，漂洗和灭菌步骤制得；制得的天然软组织去细胞基质含有微脉管系统和生物因子微环境；

所述脱脂步骤为将所述天然软组织置于脱脂剂中2-12h；所述脱脂剂选自三氯甲烷，二氯甲烷，丙酮、二氯乙烷和乙醇中的一种或多种；所述脱脂剂的用量为所述天然软组织体积的1-30倍；

所述酶处理步骤为将所述天然软组织置于含有生物酶的生理盐水或磷酸盐缓冲溶液中；所述天然软组织置于含有生物酶的生理盐水或磷酸盐缓冲溶液中的时间为1-48h；所述生物酶选自胰蛋白酶、胃蛋白酶或磷脂酶；所述生物酶的浓度为0.1-10wt％；

所述去细胞步骤为将所述天然软组织置于含有化学去垢剂的生理盐水或磷酸盐缓冲溶液中。

3.根据权利要求1或2所述的构建方法，其特征在于，所述天然软组织包括小肠组织，血管组织，肌肉组织，心脏组织，瓣膜组织，肺组织，脾脏组织，肾脏组织，肝脏组织，胃组织，胆囊组织，脂肪组织，软骨组织，气管组织，食道组织，膀胱组织，输尿管组织，输卵管组织或子宫组织；所述动物细胞包括全能干细胞，多能干细胞，专能干细胞，免疫细胞，软骨细胞，骨来源细胞，平滑肌细胞，骨骼肌细胞，心肌细胞，肝细胞，肝来源的干细胞或祖细胞，肝巨噬细胞，星状细胞，上皮细胞，肿瘤细胞，神经细胞，血管细胞，内皮细胞或成纤维细胞。

4.根据权利要求3所述的构建方法，其特征在于，该方法具体包括：

a.取灭菌后的天然软组织去细胞基质置于培养皿中；

b.将含有动物细胞的培养基悬浊液注入培养皿中；

c.将培养皿放置于培养箱中3-6小时后，继续添加培养基；

d.将动物细胞与天然软组织去细胞基质共培养3-30天得到所述组织模型，共培养期间每48小时将培养基完全更换一次。

5.根据权利要求4所述的构建方法，其特征在于，步骤a中所述培养皿为24孔板；所述培养皿中预先涂覆纤维连接蛋白；所述天然软组织去细胞基质的厚度为0.05-2mm。

6.根据权利要求4所述的构建方法，其特征在于，所述步骤b中，所述动物细胞的培养基悬浊液中动物细胞的浓度为20000-500000个/mL；注入培养皿中的所述动物细胞的培养基悬浊液的液面高度不小于所述天然软组织去细胞基质的厚度。

7.根据权利要求6所述的构建方法，其特征在于，注入培养皿中的所述动物细胞的培养基悬浊液的液面高度等于所述天然软组织去细胞基质的厚度。

8.根据权利要求4所述的构建方法，其特征在于，步骤c中继续添加的培养基的体积为步骤b中所述动物细胞的培养基悬浊液体积的1-10倍。

9.一种如权利要求1至8任一项所述的构建方法构建的组织模型，其特征在于，所述组织模型为天然软组织去细胞基质与动物细胞的体外共培养模型。

10.如权利要求9所述的组织模型在检测药物的转运，吸收，和代谢中的应用或在检测药物功效和筛选药物中的应用。