[发明专利]一种检测磷酸特地唑胺异构体杂质的方法

说明书

本发明涉及一种用液相色谱法测定磷酸特地唑胺及其异构体杂质含量的方法。所述方法包含以下步骤：1)取磷酸特地唑胺或含磷酸特地唑胺的制剂适量，用碱性磷酸酶溶液水解，反应后加乙腈溶解稀释，分离有机层，干燥后用无水乙醇溶解稀释；2)将步骤1)所得溶液注入液相色谱仪，完成磷酸特地唑胺与其对映异构体的分离测定。本发明所述方法可以有效分离检测磷酸特地唑胺样品中的对映异构体含量，且耐用性良好，从而有效控制磷酸特地唑胺及其制剂的质量。

技术领域

本发明属于药物分析领域，特别是涉及一种用液相色谱法测定磷酸特地唑胺及其异构体杂质含量的方法。

背景技术

磷酸特地唑胺(Tedizolid phosphate，式(I))是由卡毕思特制药公司(CubistPharmaceuticals)研制的一种噁唑烷酮类抗生素，于2014年6月10日获得FDA批准上市，商品名为Sivextro，用于治疗金黄色葡萄球菌和各种链球菌属和粪肠球菌等革兰氏阳性细菌引起的急性细菌性皮肤和皮肤结构感染。磷酸特地唑胺属于噁唑烷酮类抗生素，与其他类别的抗生素之间不易产生交叉耐药，同首个噁唑烷酮类抗生素利奈唑胺相比，疗效更好、安全性更高。

磷酸特地唑胺分子结构中含有1个手性碳原子，存在一对对映异构体，其中(R)-构型为活性构型，而 (S)-异构体为对映异构体杂质。在磷酸特地唑胺的分析检测过程中，二者难以分离、检测。然而，在药物定向合成过程以及终产物质量控制过程中，均需要控制对映异构体杂质的含量。因此，建立灵敏度高、专属性好的手性分析方法，实现磷酸特地唑胺与其对映异构体的分析测定，在磷酸特地唑胺的合成和制剂的制备过程中对控制药品质量具有重要意义。

目前，磷酸特地唑胺的质量标准在现行版《欧洲药典》及其药典论坛、《美国药典》及其药典论坛和中国药典2015版中均没有收载。现有技术中，“Infrared,Raman andultraviolet with circular dichroism analysis and theoretical calculations oftedizolid”，Katarzyna Michalska，等，Journal of Molecular Structure 1115，2016，136-143公开了在紫外-圆二色谱的基础上结合FT-IR以及拉曼光谱测定特地唑胺的对映体纯度的方法。此外，CN105085570A公开了一种以十八烷基硅烷键合硅胶填充色谱柱(XB-C18，4.6×300nm， 5μm)、0.025mol/L碳酸氢铵溶液-乙腈(95:5)和乙腈为流动相、梯度洗脱的方式分离样品中的磷酸特地唑胺及其光学异构体杂质的方法，然而结果表明峰拖尾情况较为严重(磷酸特地唑胺峰的拖尾因子为1.567)，不利于准确定量。可见，上述方法或者需要用到价格昂贵的仪器，或者分离状况不理想，均无法满足目前对磷酸特地唑胺中的异构体杂质进行有效、准确定量的需求。因此，开发新的能有效检测磷酸特地唑胺及其异构体杂质含量的方法是非常必要的。

发明内容

本发明的目的是提供一种用手性色谱柱分析测定磷酸特地唑胺及其光学异构体杂质含量的液相色谱方法，其可以将磷酸特地唑胺与其光学异构体进行有效分离，从而可以准确控制磷酸特地唑胺的质量，实现磷酸特地唑胺与其光学异构体的分离测定。

磷酸特地唑胺及其异构体杂质的结构如下：

本发明所述液相色谱方法分析测定磷酸特地唑胺及其光学异构体杂质含量的方法，其特征在于，首先采用碱性磷酸酶溶液对磷酸特地唑胺进行酶水解，使得磷酸特地唑胺及其异构体杂质TDPEN被水解为相应的醇产物(INA或INAEN)，反应式如下：

然后，经简单处理(萃取、干燥)后，再以三(3,5-二甲苯基)-氨基甲酸酯直链淀粉为填料的手性色谱柱，以正己烷-无水乙醇混合溶液为流动相进行液相色谱分析。

术语定义