[发明专利]检测NUP214‑ABL1基因相对表达量的试剂盒和方法在审
| 申请号： | 201710402890.2 | 申请日： | 2017-06-01 |
| 公开（公告）号： | CN107151699A | 公开（公告）日： | 2017-09-12 |
| 发明（设计）人： | 牛林梅;吴鹏飞;王淑一 | 申请（专利权）人： | 武汉艾迪康医学检验所有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12N15/11 |
| 代理公司： | 浙江杭州金通专利事务所有限公司33100 | 代理人： | 黄素萍 |
| 地址： | 430023 湖北省武汉市江*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 检测 nup214 abl1 基因 相对 表达 试剂盒 方法 | ||
1.检测NUP214-ABL1基因相对表达量的试剂盒，包括PCR反应液，其特征在于，PCR反应液包括用于扩增NUP214-ABL1融合基因的引物和探针，分别为：
NUP214-ABL1(ex23)-F：AGCACTCAGGCGGCAGAT；
NUP214-ABL1(ex29)-F：ACCACAACAGCAGCAACCTC；
NUP214-ABL1(ex31)-F：CAGTCAGGATGCAGCCAACA；
NUP214-ABL1(ex32)-F：TGGAGGAGGAAGTGTGGCAT；
NUP214-ABL1(ex34)-F：GGACCCAGAGTAGCGGATTC；
NUP214-ABL1-R：ACGAGCGGCTTCACTCAGA；
NUP214-ABL1-Probe：FAM-CCCTTCAGCGGCCAGTAGCATCT-TAMRA。
2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，还包括扩增ABL内参基因的引物和探针，分别为：
Abl-F:GATACGAAGGGAGGGTGTACCA
Abl-R:CTCGGCCAGGGTGTTGAA
Abl-Probe:FAM-TGCTTCTGATGGCAAGCTCTACGTCTCCT-TAMRA。
3.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，还包括阴性对照品和空白对照品。
4.一种NUP214-ABL1融合基因相对表达量的方法，包括以下步骤：
(1)提取样本中的RNA；
(2)将(1)提取出的RNA逆转录为cDNA，并将所产生的cDNA加入到反应管中；
(3)加入检测内参基因Abl的上游引物Abl-F、下游引物Abl-R和探针Abl-Probe；
(4)加入检测所述融合基因的上游引物、下游引物和探针；
(5)进行PCR扩增反应；
(6)计算所述融合基因的相对表达量，
其特征在于，扩增所述融合基因的引物和探针分别为：
NUP214-ABL1(ex23)-F：AGCACTCAGGCGGCAGAT；
NUP214-ABL1(ex29)-F：ACCACAACAGCAGCAACCTC；
NUP214-ABL1(ex31)-F：CAGTCAGGATGCAGCCAACA；
NUP214-ABL1(ex32)-F：TGGAGGAGGAAGTGTGGCAT；
NUP214-ABL1(ex34)-F：GGACCCAGAGTAGCGGATTC；
NUP214-ABL1-R：ACGAGCGGCTTCACTCAGA；
NUP214-ABL1-Probe：FAM-CCCTTCAGCGGCCAGTAGCATCT-TAMRA。
5.根据专利要求4所述的基因表达量检测方法，其特征在于，还包括所述Abl内参基因的引物和探针，分别为：
Abl-F:GATACGAAGGGAGGGTGTACCA
Abl-R:CTCGGCCAGGGTGTTGAA
Abl-Probe:FAM-TGCTTCTGATGGCAAGCTCTACGTCTCCT-TAMRA。
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