[发明专利]原发性免疫缺陷病的致病突变及其应用

说明书

本申请公开了与原发性免疫缺陷病相关的两种新的致病突变及其应用。上述两个新的致病突变具体为：1)位于IL2RG基因上的c.220TA突变；2)位于CYBB基因上的c.141+3AT突变。本申请提供的关于PID的新的致病突变，为该疾病的诊断和治疗了新的可检测位点；同时，采用本申请提供的试剂盒，可快速有效的检测出PID的上述相关突变。

技术领域

本发明涉及分子生物医学领域，具体涉及原发性免疫缺陷病的致病突变及其应用，具体的，涉及与该病症相关的核酸、多肽、载体、重组细胞以及相关应用，还涉及一种能检测原发性免疫缺陷病的致病突变的试剂盒。

背景技术

原发性免疫缺陷病(Primary immunodeficiency disorder,PID)是免疫系统发生基因变异，导致免疫细胞和分子功能缺陷的一类疾病，临床表现为易患感染、恶性肿瘤、过敏、炎症和自身免疫病。由于PID罕见疾病，加之临床表型复杂，临床医生难以在早期确诊，使得严重PID患者多于早年死亡；存活病例常因诊断延误导致反复严重感染和其他慢性进程，最终发生器官衰竭和致残。PID属罕见病，真实发病率尚不清楚，近年PID发病率有增高趋势。由于PID是遗传异质性疾病，临床表型多变，致病基因多，目前仍有很多其相关的致病基因和致病突变未被发现，因此，关于PID的研究工作仍需不断深入开展。

发明内容

基于对PID的深入研究，本申请提出了两个关于PID的新的致病突变，并对其进行了应用领域的相关研究。

根据本申请的第一方面，本申请提供了一种核酸，该核酸与原发性免疫缺陷病相关，该核酸与野生型IL2RG基因相比，存在c.220TA突变；或该核酸与野生型CYBB基因相比，存在c.141+3AT突变。

根据第二方面，本申请提供了一种多肽，该多肽与原发性免疫缺陷病相关，该多肽与野生型IL2RG蛋白相比，其存在p.Trp74Arg突变，或该多肽与野生型CYBB蛋白相比，其缺失野生型CYBB蛋白的第48至84位的氨基酸序列。

根据第三方面，本申请提供了一种用于检测PID致病突变的试剂盒，该试剂盒含有用于检测IL2RG基因和CYBB基因突变中的至少一种的试剂，其中，上述突变包括：相比野生型IL2RG基因，该突变具有c.220TA突变；相比野生型CYBB基因，该突变具有c.141+3AT突变。

进一步的，上述试剂包括核酸探针和引物中的至少一种。

在本申请的一种具体实施方式中，上述检测PID基因突变的试剂盒中，该试剂盒中的试剂包括引物对，具体包括如下两组引物对中的至少一组：1)引物对具有如SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示的序列，可用于检测IL2RG基因上的c.220TA突变。2)引物对具有如SEQID NO:3和SEQ ID NO:4所示的序列，可用于检测CYBB基因上的c.141+3AT突变。

在本申请的一种具体实施方式中，上述检测PID基因突变的试剂盒中，该所述试剂包括带有可识别标记的核酸探针，所述核酸探针的序列选自如如SEQID NO:5-SEQ ID NO:15所示的序列中的至少一种。其中，如SEQ ID NO:5-SEQID NO:12所示序列，可用于检测IL2RG基因上的c.220TA突变。如SEQ IDNO:13-SEQ ID NO:15所示的序列，可用于检测CYBB基因上的c.141+3AT突变。

根据本申请的第四方面，本申请提供了一种载体，该载体包含本申请第一方面所述的核酸。

需要说明的是，载体是指用于将目的基因转移至受体细胞的一种能自我复制的遗传载体。本申请提供的载体中的目的基因即为本申请第一方面提供的核酸。本领域技术人员应该理解，适用于本申请的载体的具体形式是多种多样的，包括但不限于质粒、人工染色体(BAC)、Cosmid等。本领域技术人员可以根据需要选择合适载体形式。

根据本申请的第五方面，本申请提供了一种重组细胞，该重组细胞通过本申请第四方面所述的载体转化受体细胞而获得。