[发明专利]一种氯霉素电化学传感器检测方法

说明书

本发明涉及一种氯霉素的快速灵敏检测方法，其主要技术特点在于采用序介孔碳@多巴胺复合物膜和β‑环糊精双重修饰电极，利用氯霉素的电化学活性，建立对氯霉素具有广泛检测范围的快速灵敏检测方法。本发明成本低廉，实验操作简单，灵敏度高，适用于各种食品中氯霉素的检测。

技术领域

本发明涉及一种氯霉素电化学传感器检测方法，属于食品安全检测技术领域，特别是一种氯霉素的快速灵敏检测方法。

背景技术

氯霉素(chloramphenicol，(1R,2R)-N-[α-(羟基甲基)-β-羟基-对硝基苯乙基]-2,2-二氯乙酰胺)，最初是从由委内瑞拉链霉菌培养液中提取制得。1948年其结构被确定并成为第一种完全由人工合成的抗生素，是一种高效广谱抗生素。它由于抑菌效果好，价格低曾被广泛应用于各类动物源性食品加工过程中。也正因为其应用广泛，滥用现象日趋严重，氯霉素对造血系统的严重损伤也越来越引起人们的重视。中华人民共和国农业部规定氯霉素在动物源性食品中不得检出。

目前国内外有关食品中氯霉素检测方法大都采用液相色谱法或液相、气相色谱与质谱联用的方法进行定性、定量的检测，但上述几种检测方法所使用的设备价格昂贵，分析时间长并且需要复杂的样品前处理技术。电化学传感器具有反映速度快、准确、稳定性好、成本低等特点。因此，以有序介孔碳@多巴胺复合物膜和β-环糊精修饰电极，构建高灵敏电化学传感器，用于食品中痕量氯霉素的定量检测，具有重要意义。本发明以有序介孔碳@多巴胺复合物膜和β-环糊精修饰电极，建立可用于痕量氯霉素检测的电化学传感器未见报道。

发明内容

为了解决上述问题，本发明提供了一种氯霉素电化学传感器检测方法，目的在于克服传统的氯霉素检测方法存在的检测时间长、仪器价格昂贵、前处理烦琐等缺陷，提供一种氯霉素的快速灵敏检测方法。

本发明采取的技术方案是：

一种氯霉素电化学传感器检测方法，步骤如下：

1)电化学传感器电极修饰：

将100～500mg有序介孔碳CMK-3，50～200mg盐酸多巴胺和100～120mg Tris(三羟甲基氨基甲烷)加入到100mL超纯水中，冰浴条件下超声分散1～5min，室温搅拌8～10h，过滤、洗涤、干燥后得到CMK-3@PDA复合材料。将8～12μL浓度为1.5mgmL^-1的CMK-3@PDA复合材料溶液滴涂在裸玻碳电极表面，室温下晾干，得到修饰后的CMK-3@PDA/GCE电极；将CMK-3@PDA/GCE电极浸入到浓度为0.5～1.0molL^-1NaOH溶液中利用循环伏安法在-1.25V－+0.8V电位范围内以50mVs^-1的速率扫描6～12圈。然后将CMK-3@PDA/GCE电极浸入到β-环糊精溶液(称取0.227gβ-环糊精，用0.1molL^-1pH7.0的磷酸缓冲溶液溶解，转移到容量瓶中定容到100mL，得到2.0mmolL^-1的β-环糊精溶液)中用循环伏安法在-2.0V－+2.5V范围内以100mVs^-1的速率扫描6～8圈，得到有序介孔碳@多巴胺复合物膜和β-环糊精双重修饰电极(β-CD/CMK-3@PDA/GCE)。

2)将饱和甘汞电极和铂电极分别作为参比电极和辅助电极，步骤1)制备的修饰电极β-CD/CMK-3@PDA/GCE作为工作电极构成三电极体系，利用方波伏安法在电位窗口0－-0.2V，电位增量2.0mVs^-1，方波振幅100mV，方波频率20HZ的条件下，将工作电极浸入用0.2molL^-1pH7.0的磷酸盐缓冲溶液配制的不同浓度氯霉素标准溶液中孵育，记录相应电流值I_P。

3)以氯霉素标准溶液浓度C为横坐标，电流值为纵坐标，绘制I_P‐C工作曲线。按照下列公式计算不同电流值对应的样品中氯霉素的含量：