[发明专利]一种绿盲蝽细胞核激素受体E75、其编码序列、载体和菌株

说明书

本发明公开用于编码绿盲蝽细胞核激素受体E75的DNA序列。本发明还公开绿盲蝽细胞核激素受体E75，用于编码绿盲蝽细胞核激素受体E75的DNA序列的重组表达载体、转基因细胞系统或转基因重组菌，所述的重组表达载体、转基因细胞系统或转基因重组菌在生产绿盲蝽细胞核激素受体E75中的应用及绿盲蝽细胞核激素受体E75的制备方法。利用绿盲蝽细胞核激素受体E75基因，构建其pCzn‑E75重组质粒，转入TOP10克隆菌株并在Arctic Express表达菌株中经IPTG诱导后能产生所述蛋白的包涵体，再经变性、复性可形成所述的蛋白，并加以纯化制得。制得的蛋白分子量约为75KD，蛋白浓度为0.4 mg/ml。

技术领域

本发明涉及农业科学技术领域，具体涉及一种绿盲蝽细胞核激素受体E75、其编码序列、载体和菌株。

背景技术

绿盲蝽Apolygus lucorum(Hemiptera:Miridae)属半翅目盲蝽科，是棉花、蔬菜、果树、牧草等多种农作物上的重要害虫。近年来，由于转Bt基因棉的大面积种植和农业产业结构的调整等原因，绿盲蝽种群数量急剧上升，加之长期依赖化学农药防治，致使绿盲蝽的抗药性日渐增强，目前农业生产上的绿盲蝽防控面临严峻挑战，急待开拓减少化学农药使用的新型无公害防控手段。

类固醇激素20-羟基蜕皮酮(20-hydroxyecdysone，20E)是昆虫蜕皮激素的主要活性形式，在昆虫的变态发育过程中起着重要的调控作用。细胞核激素受体E75是蜕皮激素的作用靶标，是昆虫体内重要的调控蛋白，目前已成为新型杀虫剂的重要靶标之一。E75隶属于昆虫核受体，一般含有4个模块结构域：A/B域、C域、D域和E域。其中C域及D域相对保守，C域含有2个锌脂结构，E域存在一个配体结合袋。研究绿盲蝽AlE75基因结构及获得其重组蛋白，可望为以蜕皮激素受体为靶标的新型杀虫剂提供前期的理论基础。

发明内容

发明目的：本发明所要解决的技术问题是提供了用于编码绿盲蝽细胞核激素受体E75的DNA序列，如SEQ ID NO：1所示。

本发明还要解决的技术问题是提供了绿盲蝽细胞核激素受体E75，其氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示。

本发明还要解决的技术问题是提供用于含有用于编码绿盲蝽细胞核激素受体E75的DNA序列的重组表达载体、转基因细胞系统或转基因重组菌。

本发明还要解决的技术问题是提供了所述的重组表达载体、转基因细胞系统或转基因重组菌在生产绿盲蝽细胞核激素受体E75中的应用。

本发明还要解决的技术问题是提供了绿盲蝽细胞核激素受体E75重组蛋白的制备方法。

技术方案：为了解决上述问题，本发明的技术方案是提供一种用于编码绿盲蝽细胞核激素受体E75的DNA序列，其碱基序列如SEQ ID NO：1所示。

本发明内容还包括一种绿盲蝽细胞核激素受体E75，其氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示。

本发明内容还包括含有用于编码绿盲蝽细胞核激素受体E75的DNA序列的重组表达载体、转基因细胞系统或转基因重组菌。

其中，上述的重组表达载体，还包括将上述的DNA序列插入到大肠杆菌表达载体中得到的表达绿盲蝽细胞核激素受体E75的重组表达载体。

其中，上述大肠杆菌表达载体为pCzn1。

其中，上述重组菌是将上述的重组表达载体导入大肠杆菌中，筛选得到转基因重组菌。

其中，上述的大肠杆菌为Arctic Express。

本发明内容还包括将上述的DNA序列、重组表达载体、转基因细胞系统或转基因重组菌在生产绿盲蝽细胞核激素受体E75中的应用。