[发明专利]一种绿盲蝽细胞核激素受体E75、其编码序列、载体和菌株有效
| 申请号： | 201710390522.0 | 申请日： | 2017-05-27 |
| 公开（公告）号： | CN107043776B | 公开（公告）日： | 2019-07-23 |
| 发明（设计）人： | 谭永安;肖留斌;柏立新;赵静;孙洋 | 申请（专利权）人： | 江苏省农业科学院 |
| 主分类号： | C12N15/12 | 分类号： | C12N15/12;C07K14/72;C12N15/70;C12N1/21;C12R1/19 |
| 代理公司： | 南京苏高专利商标事务所(普通合伙) 32204 | 代理人： | 王艳 |
| 地址： | 210014 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 细胞核激素受体 重组表达载体 转基因重组菌 转基因细胞 蛋白 蛋白分子量 编码序列 表达菌株 克隆菌株 重组质粒 包涵体 复性 构建 菌株 制备 转入 基因 应用 生产 | ||
1.一种用于编码绿盲蝽细胞核激素受体E75的DNA序列，其碱基序列如SEQ ID NO：1所示。
2.一种绿盲蝽细胞核激素受体E75，其特征在于，其氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示。
3.含有权利要求1所述的用于编码绿盲蝽细胞核激素受体E75的DNA序列的重组表达载体、转基因细胞系统或转基因重组菌。
4.根据权利要求3所述的重组表达载体，其特征在于，将权利要求1所述的DNA序列插入到大肠杆菌表达载体中得到的表达绿盲蝽细胞核激素受体E75的重组表达载体。
5.根据权利要求4所述的重组表达载体，其特征在于，所述大肠杆菌表达载体为pCzn1。
6.根据权利要求3所述的转基因重组菌，其特征在于，所述重组菌是将权利要求4或5所述的重组表达载体导入大肠杆菌中，筛选得到转基因重组菌。
7.根据权利要求6所述的转基因重组菌，其特征在于，所述的大肠杆菌为ArcticExpress。
8.权利要求1所述的DNA序列、权利要求3所述的重组表达载体、转基因细胞系统或转基因重组菌在生产绿盲蝽细胞核激素受体E75中的应用。
9.一种绿盲蝽细胞核激素受体E75的制备方法，是培养权利要求3或6所述的转基因重组菌得到绿盲蝽细胞核激素受体E75。
10.一种绿盲蝽细胞核激素受体E75的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
1）、用于编码绿盲蝽细胞核激素受体E75基因的扩增，所述E75基因序列如权利要求1所述的SEQ ID NO：1所示；
2）、绿盲蝽细胞核激素受体E75基因的原核表达载体构建；将构建的原核表达载体在大肠杆菌中转化，再经过IPTG诱导获得绿盲蝽细胞核激素受体E75；
3）、绿盲蝽细胞核激素受体E75的变性和复性；
4）、绿盲蝽细胞核激素受体E75的纯化；
所述步骤2）转化大肠杆菌TOP10后采用PCR筛选阳性克隆。
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