[发明专利]肿瘤靶向的新型钌多吡啶配合物载siRNA的制备与评价

权利要求书

1.一种具有抗肿瘤活性的基因递送系统，由抗肿瘤基因治疗药物VEGF-siRNA和基因载体Ru-CO-RGDS制备而成。

2.权利要求1所述的基因递送系统，其特征在于，Ru-CO-RGDS和VEGF-siRNA的重量比为1.66：1。

3.权利要求1所述的基因递送系统，为纳米结构。

4.权利要求1所述的基因递送系统的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：基因载体Ru-CO-RGDS与抗肿瘤基因治疗药物VEGF-siRNA在常温下以质量比为1.66:1混合，即得Ru-CO-RGDS/VEGF-siRNA。

5.权利要求4所述的制备方法，其特征在于，Ru-CO-RGDS的制备方法如下：4’-甲基-(2，2’-联吡啶)-4-甲酸与HCl·Arg(Tos)-Gly-Asp(OBzl)-Ser-OBzl液相接肽法，用三氟乙酸/三氟甲磺酸脱去保护基，形成4’-甲基-(2，2’-联吡啶)-4-酰基-RGDS，最后与钌吡啶配合物回流反应即得Ru-CO-RGDS。

6.权利要求4所述的制备方法，其特征在于，Ru-CO-RGDS的制备方法如下：通过液相接肽法，将4’-甲基-(2，2’-联吡啶)-4-甲酸与HCl·Arg(Tos)-Gly-Asp(OBzl)-Ser-OBzl在THF/DMF中通过DDC/HOBt反应，得到4’-甲基-(2，2’-联吡啶)-4-酰基-R(Tos)-G-D(OBzl)-S-OBzl；然后用三氟乙酸/三氟甲磺酸脱去保护基，形成4’-甲基-(2，2’-联吡啶)-4-酰基-RGDS；将顺-2,2'联吡啶二氯化钌与4’-甲基-(2，2’-联吡啶)-4-酰基-RGDS在N2环境下避光回流反应，回流反应结束后，旋干溶液，加入纯净水溶解后，加入饱和六氟磷酸盐溶液，出现红橙色沉淀，离心，取上清液，旋干，甲醇乙醚体系重结晶，得到Ru-CO-RGDS。

7.权利要求4所述的制备方法，其特征在于，Ru-CO-RGDS/VEGF-siRNA的制备方法如下：将VEGF-siRNA与小牛胸腺DNA按照2：1(v:v)的比例混合，反复吹打，室温下静置10min，同时将Ru-CO-RGDS与鱼精蛋白混合，反复吹打，室温下静置10min，然后将Ru-CO-RGDS/鱼精蛋白复合物加入到VEGF-siRNA/DNA复合物中，反复快速吹打，室温静置30min，即得Ru-CO-RGDS/VEGF-siRNA。