[发明专利]口服诺如病毒亚单位疫苗及LT作为该疫苗佐剂的用途

说明书

技术领域

本发明属于生物医药领域，具体而言，涉及口服诺如病毒亚单位疫苗及dmLT作为该疫苗佐剂，用于预防诺如病毒感染的用途。

背景技术

继轮状病毒疫苗大规模使用后，诺如病毒已成为全球病毒感染性急性胃肠炎的首要病因。流行病学资料显示目前超过50％的病毒性胃肠炎均由诺如病毒感染引起，其传染性较强，可通过污染的水源、食物、物品接触、空气等传播，常在社区、学校、餐馆、医院、托儿所、孤老院及军队等人员密集处引起规模性暴发流行，且在全年各季节中均有发生。由于诺如病毒感染后没有特效抗病毒药物治疗，导致在免疫力较弱的婴幼儿及老年人中的死亡率较高，加之大范围爆发流行会引发一系列公共卫生问题，造成严重的社会经济损失,因此，研发可有效预防该病毒传播导致疾病的疫苗迫在眉睫。

长期以来，诺如病毒疫苗的研发受病毒不能培养、缺乏合适的实验模型导致保护效果难以评价的技术瓶颈制约而徘徊不前。目前，通过基因工程技术表达诺如病毒的衣壳蛋白可自我组装形成病毒样颗粒(VLPs)。有动物及临床实验结果表明，诺如病毒VLPs具有很好的免疫原性，通过注射途径免疫诺如病毒VLPs可诱导出较好的系统性体液免疫应答(抗体反应)。由于诺如病毒主要通过胃肠道感染，一个可有效预防病毒感染的疫苗应具备可诱导全面、系统的保护性免疫，包括肠道局部粘膜免疫应答和系统性保护性免疫反应的特质，这对一个新型疫苗是否可发挥有效免疫保护作用至关重要。尤其在病毒感染初期，肠道局部的特异性免疫力将发挥重要的抗病毒作用。然而，免疫学研究表明，通过注射途径呈递的疫苗将难以诱导肠道粘膜局部的免疫应答，只有经粘膜途径呈递疫苗抗原才能同时诱导粘膜局部及系统性免疫反应。目前，尚未见经口服途径呈递免疫诺如病毒VLPs引起肠道粘膜局部(包括肠道粘膜表皮内和粘膜下固有层)抗感染类T细胞免疫反应的报道。一个经口服呈递并被证明具有可刺激肠道粘膜局部和全身系统性抗感染保护性免疫反应的疫苗无疑对诺如病毒疫苗的研发是个突破。

发明内容

本发明的目的是提供一种可经粘膜途径呈递的口服诺如病毒亚单位疫苗，其可以预防诺如病毒感染，或具有潜在的治疗作用。

为实现该目的，本发明提供了：

(1)一种口服诺如病毒亚单位疫苗，包含一种或多种基因型的诺如病毒VLPs，其特征在于所述口服诺如病毒亚单位疫苗包含减毒的且具有粘膜免疫佐剂效应的大肠杆菌不耐热肠毒素作为佐剂，其中所述亚单位疫苗的单次口服剂量为每种所述诺如病毒VLPs 50-7500μg，佐剂10-100μg。

(2)根据(1)所述的口服诺如病毒亚单位疫苗，其中所述亚单位疫苗的单次口服剂量为每种所述诺如病毒VLPs 50-5000μg，优选100-5000μg，更优选150-3000μg，所述佐剂10-50μg，更优选10-30μg。

(3)根据(1)所述的口服诺如病毒亚单位疫苗，其中所述亚单位疫苗通过含服或吞服施用。

(4)根据(1)所述的口服诺如病毒亚单位疫苗，其中所述亚单位疫苗的施用方案为，以单次口服剂量免疫2-5次，每次间隔1-2周。

(5)根据(1)所述的口服诺如病毒亚单位疫苗，其中所述减毒的且具有粘膜免疫佐剂效应的大肠杆菌不耐热肠毒素为双突变大肠杆菌不耐热肠毒素。

(6)根据(5)所述的口服诺如病毒亚单位疫苗，其中所述双突变为A亚基R192G和L211A双突变。

(7)根据(1)所述的口服诺如病毒亚单位疫苗，其中所述诺如病毒VLPs采用大肠杆菌原核系统、酵母菌表达系统或昆虫细胞表达系统表达。

(8)根据(1)所述的口服诺如病毒亚单位疫苗，其中所述诺如病毒VLPs的基因型包括GI基因群1、2、3、4、9型；GII基因群1、2、3、4、6、7、P7、17、P17型；以及GIV基因群1型。

(9)减毒的且具有粘膜免疫佐剂效应的大肠杆菌不耐热肠毒素作为口服诺如病毒亚单位疫苗的佐剂的用途。

(10)根据(9)所述的用途，其中所述诺如病毒亚单位疫苗能够引起系统性和肠道局部粘膜保护性体液免疫、以及肠道粘膜抗感染淋巴细胞免疫。

本发明与现有技术相比具有以下优点和积极效果：

1.根据诺如病毒经粘膜途径感染的特点，经过构思和设计疫苗策略，并且经过大量的实验摸索和验证，本发明在诺如病毒疫苗的配方中引入了减毒的、具有粘膜免疫佐剂效应的大肠杆菌不耐热肠毒素作为疫苗佐剂，从而获得了可经口服呈递的、效果理想的诺如病毒亚单位疫苗。