[发明专利]快速检测SLCO1B1基因突变的试剂盒及检测方法在审
| 申请号： | 201710376547.5 | 申请日： | 2017-05-25 |
| 公开（公告）号： | CN107058570A | 公开（公告）日： | 2017-08-18 |
| 发明（设计）人： | 韦玉军;李航;李静;苏军;吴远航 | 申请（专利权）人： | 安徽安龙基因医学检验所有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 杭州君度专利代理事务所(特殊普通合伙)33240 | 代理人： | 王桂名 |
| 地址： | 230000 安徽省合肥市庐阳*** | 国省代码： | 安徽;34 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 快速 检测 slco1b1 基因突变 试剂盒 方法 | ||
1.一种快速检测SLCO1B1基因突变的试剂盒，其特征在于：包括：Taq DNA聚合酶、10×PCR反应缓冲液、MgCl2、dNTPs、内源上游引物FI、内源下游引物RI、外源上游引物FO、外源下游引物RO。
2.根据权利要求1所述的一种快速检测SLCO1B1基因突变的试剂盒，其特征在于：所述内源上游引物FI、内源下游引物RI、外源上游引物FO、外源下游引物RO分别是：
FI：5’-TCTTATCTACATAGGTTGTTTAAAGGATTC-3’
RI:5’-ACCATATATCCACATGTATGACCGAC-3’
FO:5’-TGTATTTATTAGCAGCATAAGAATGGAC-3’
RO:5’-CAAAGGGAAAGTGATCATACAATTTAAT-3’。
3.根据权利要求1所述的一种快速检测SLCO1B1基因突变的试剂盒，其特征在于：所述Taq DNA聚合酶的浓度为0.1U/ul，Mg2+浓度为4mM，dNTP混合物浓度为0.4mM，引物浓度为10μM。
4.根据权利要求1-3任一所述的一种快速检测SLCO1B1基因突变的试剂盒的检测方法，其特征在于：具体步骤如下：
(1)、提取血液DNA，并稀释至100ng/ul；
(2)、取20ul ARMS-PCR反应体系；
(3)、将混合后的反应液放入PCR仪中，设置程序如下：
95℃预变性10min，接着进入1个循环，95℃变性15s，45℃退火45s，72℃延伸45s，共32个循环，之后，继续72℃延伸8min，1个循环，然后将PCR反应产物进行凝胶电泳分析。
5.根据权利要求4所述的一种快速检测SLCO1B1基因突变的试剂盒的检测方法，其特征在于：所述的步骤(2)中，所述的ARMS-PCR反应体系，具体包括：10×PCR Buffer 2μl，FI 1μl，RI 1μl，FO 1-10μl，RO 1-10μl dNTP混合物1.6μl，Taq DNA聚合酶0.4μl，Mg2+1.6μl,DNA模板1μl，加ddH2O至20μl。
6.根据权利要求4所述的一种快速检测SLCO1B1基因突变的试剂盒的检测方法，其特征在于：所述的PCR反应体系中内源引物和外源引物的比为1:1-10。
7.根据权利要求4所述的一种快速检测SLCO1B1基因突变的试剂盒的检测方法，其特征在于：凝胶电泳分析中使用浓度为3％琼脂糖凝胶。
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