[发明专利]检测人体尿液中新蝶呤和生物蝶呤的方法

权利要求书

1.一种检测人体尿液中新蝶呤和生物蝶呤的方法，包括如下步骤：

1)前处理：对尿液进行液相检测前处理；

2)液相洗脱：将前处理后的尿样以液相色谱进行分析，所述分析条件为：

固定相：色谱柱为反向键合硅胶柱；

流动相：A相为甲醇；B相为15～25 mmol/L的乙酸铵缓冲液，并以乙酸调pH 5.5～7.0；梯度洗脱方式；

3)检测：以荧光检测器检测；

所述前处理步骤之前，还包括预处理步骤，所述预处理步骤为：尿液收集后立即加入5～7M的盐酸，冷冻避光保存；

所述液相洗脱步骤中：

所述色谱柱为Poroshell 120 EC-C18；

所述梯度洗脱方式为：

时间 (分钟)	流动相 A%*	流动相 B%*
0.00	0	100
2.5	0	100
4.0	10	90
4.5	90	10
6.5	90	10
7.0	0	100
8.5	0	100

色谱柱的柱温为28～32℃；

流动相的流速为0.3～0.5 mL/min；

液相洗脱时的进样量为0.5～2μL；

检测条件为：激发光波长为358～362nm，发射光波长为448～452nm；

在进行液相洗脱时，间歇性对色谱柱进行冲柱；

进样盘的温度为2～6℃。