[发明专利]貉犬瘟热冻干活疫苗及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种貉犬瘟热冻干活疫苗，其特征在于其有效成分为貉犬瘟热病毒弱毒疫苗株，所述的貉犬瘟热病毒弱毒疫苗株命名为CDV-OR12株，该疫苗株保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址在北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，微生物保藏号为CGMCC NO.13793，保藏时间为2017年04月21日。

2.如权利要求1所述的貉犬瘟热冻干活疫苗，其特征在于所含有的貉犬瘟热病毒弱毒疫苗株的TCID₅₀≥10^4.5/头份。

3.如权利要求1所述的貉犬瘟热冻干活疫苗，其特征在于所含有的貉犬瘟热弱毒疫苗株的TCID₅₀为10^4.5-10^5.5/头份。

4.如权利要求1所述的貉犬瘟热冻干活疫苗，其特征在于还包括冻干保护剂，所述的冻干保护剂中包括明胶、水解乳蛋白和蔗糖。

5.一种制备权利要求1所述的貉犬瘟热冻干活疫苗的方法，其特征在于包括以下步骤：

(1)取所述的貉犬瘟热病毒弱毒疫苗株CDV-OR12株以吸附接毒的方式接种Vero细胞上进行病毒扩增培养，每日观察细胞病毒情况，待细胞病变达到75-85％时通过反复冻融的方法收获病毒液，并进行病毒含量、纯净性检验，将检验合格的病毒液保存于-20℃；

(2)将明胶、水解乳蛋白和蔗糖溶解于水中，按照质量百分比计，使明胶的终浓度为2～7％，水解乳蛋白的终浓度为10～25％，蔗糖终浓度为15～30％，于116℃、20min高压灭菌后得到冻干保护剂；

(3)按照3～5体积份病毒液加入2体积份冻干保护剂的比例，将步骤(1)得到的病毒液与冻干保护剂充分混合，定量分装于无菌的青瓶内，加盖置于冻干机内预冻、干燥，即得。

6.如权利要求5所述的方法，其特征在于步骤(1)中所述的病毒液中貉犬瘟热病毒弱毒疫苗株的含量TCID₅₀≥10^6.0/ml。

7.如权利要求5所述的方法，其特征在于制备得到的疫苗成品中貉犬瘟热病毒弱毒疫苗株的含量TCID₅₀≥10^4.5/头份。

8.如权利要求7所述的方法，其特征在于制备得到的疫苗成品中貉犬瘟热病毒弱毒疫苗株的TCID₅₀为10^4.5-10^5.5/头份。

9.权利要求1-4任一项所述的貉犬瘟热冻干活疫苗在制备预防貉犬瘟热药物中的用途。