[发明专利]一种利用酶标记核酸适配体检测黄曲霉毒素B1的方法有效
| 申请号： | 201710339460.0 | 申请日： | 2017-05-15 |
| 公开（公告）号： | CN107192816B | 公开（公告）日： | 2021-07-16 |
| 发明（设计）人： | 赵强;孙琳琳 | 申请（专利权）人： | 中国科学院生态环境研究中心 |
| 主分类号： | C12N15/115 | 分类号： | C12N15/115;G01N33/535;G01N21/31 |
| 代理公司： | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人： | 关畅;何叶喧 |
| 地址： | 100085 北京市海淀区*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 利用 标记 核酸 体检 黄曲霉 毒素 b1 方法 | ||
1.一种检测黄曲霉毒素B1的方法，依次包括如下步骤：
（1）取具有包被的微孔板，加入待测样本和特异探针，室温静置孵育30分钟，然后洗涤；
（2）通过检测特异探针相应的信号实现对黄曲霉毒素B1的检测；
所述具有包被的微孔板为如下（a）或（b）：
（a）包被有黄曲霉毒素B1-BSA偶联物的微孔板；
（b）包被有黄曲霉毒素B1和载体蛋白的偶联物的微孔板；
所述特异探针为特异探针甲；所述特异探针甲为元件甲和元件乙的结合物；所述元件甲为在与黄曲霉毒素B1特异结合的核酸适配体的末端借助三甘醇作为连接臂连接生物素得到的物质；所述元件乙为辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素；
所述与黄曲霉毒素B1特异结合的核酸适配体如序列表的序列1所示；
所述微孔板为非透明微孔板；所述步骤（2）的实现方式为：加入化学发光底物溶液，室温静置孵育5分钟后测定化学发光强度。
2.一种用于检测黄曲霉毒素B1的试剂盒，包括特异探针、具有包被的微孔板和化学发光底物溶液；
所述特异探针为特异探针甲；所述特异探针甲为元件甲和元件乙的结合物；所述元件甲为在与黄曲霉毒素B1特异结合的核酸适配体的末端借助三甘醇作为连接臂连接生物素得到的物质；所述元件乙为辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素；
所述具有包被的微孔板为如下（a）或（b）：
（a）包被有黄曲霉毒素B1-BSA偶联物的微孔板；
（b）包被有黄曲霉毒素B1和载体蛋白的偶联物的微孔板，
所述与黄曲霉毒素B1特异结合的核酸适配体如序列表的序列1所示。
3.权利要求2所述试剂盒在检测黄曲霉毒素B1中的应用。
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