[发明专利]一种同时敲除KRAS基因和EGFR基因的CRISPR-Cas9系统及其应用有效
| 申请号： | 201710332598.8 | 申请日： | 2017-05-12 |
| 公开（公告）号： | CN107130000B | 公开（公告）日： | 2019-12-17 |
| 发明（设计）人： | 陈锦阳;邓兆群 | 申请（专利权）人： | 浙江卫未生物医药科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/90 | 分类号： | C12N15/90;C12N9/22;A61K48/00;A61K31/713;A61P35/00 |
| 代理公司： | 33235 杭州华知专利事务所(普通合伙) | 代理人： | 赵梅 |
| 地址： | 310052 浙江省杭州市滨*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 敲除 特异性靶向 肺癌 癌症 制备治疗癌症 系统操作 异常表达 应用 驱动 治疗 | ||
1.一种同时敲除KRAS基因和EGFR基因的CRISPR-Cas9系统，其特征在于，包括Cas9及特异性靶向KRAS基因的sgRNA和特异性靶向EGFR基因的sgRNA；特异性靶向KRAS基因的sgRNA对应的DNA序列如SEQ ID NO.1或/和SEQ ID NO.2所示，特异性靶向EGFR基因的sgRNA对应的DNA序列如SEQ ID NO.11或/和SEQ ID NO.12所示。
2.根据权利要求1所述的同时敲除KRAS基因和EGFR基因的CRISPR-Cas9系统，其特征在于，特异性靶向KRAS基因的sgRNA和Cas9存在一质粒中，特异性靶向EGFR基因的sgRNA和Cas9存在另一质粒中。
3.根据权利要求1所述的同时敲除KRAS基因和EGFR基因的CRISPR-Cas9系统，其特征在于，所述CRISPR-Cas9系统还包括2种带不同抗性标记及荧光标记的Cas9骨架载体。
4.根据权利要求3所述的同时敲除KRAS基因和EGFR基因的CRISPR-Cas9系统，其特征在于，所述Cas9骨架载体为有U6启动子表达的Cas9骨架载体。
5.权利要求1-4任一权利要求所述的同时敲除KRAS基因和EGFR基因的CRISPR-Cas9系统在制备KRAS基因和EGFR基因同时敲除的细胞模型或动物模型中的应用。
6.权利要求1-4任一权利要求所述的同时敲除KRAS基因和EGFR基因的CRISPR-Cas9系统在制备治疗癌症药物中的应用。
7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述癌症包括肺癌、肝癌或胰腺癌。
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