[发明专利]一种黄精的组织培养方法

说明书

本发明公开了一种黄精的组织培养方法，包括以下步骤：A.愈伤诱导培养，B.愈伤增殖培养，C.丛生芽诱导培养，D.生根培养。本发明方法可使黄精长势好，诱导率高达为54.76%，愈伤增殖倍数为6.67、愈伤平均体积2.99mL、愈伤平均重量为2.17g、致密个数占33.33%、长势极好的占40%、愈伤组织颜色大都为绿白色；平均出芽率高达86.11%、平均丛生芽个数为18.6、平均芽高为1.7cm。平均生根率达到66.67%、平均根数高达30条以上、平均根长0.45以上cm、平均根粗1.0mm以上。

技术领域

本发明涉及一种黄精的组织培养方法，特别是一种长势好的黄精的组织培养方法。

技术背景

黄精为我国常用的中药材，是百合科(Liliaceae)黄精属(Polygonatum)多年生草本植物根茎的总称。黄精化学成份主要有糖类、黄酮及蒽醌类化合物、甾体皂苷、生物碱、强心苷、木脂素、维生素和多种对人体有用的氨基酸及微量元素等；药理研究认为，黄精具有延长寿命、抗衰老、影响心血管系统、提高免疫能力、抗炎、抗病原微生物、抗疲劳、提高学习记忆力、抑制肿瘤细胞等作用，且安全无毒、无致突变性。临床应用研究报道，黄精及其制剂对呼吸系统、心血管系统、消化系统以及白细胞减少症、糖尿病、结核病、老年痴呆、外生殖器感染、足癣甲癣、蛲虫病、慢性肝炎、秃发、习惯性流产和不育症、慢性荨麻疹、痛风性关节炎、瘰疠等疾病均有明显疗效。另外，黄精还可用于制饮料、做蜜饯、加工保健品和护肤品、充当猪饲料添加剂以及作蔬菜和观赏花卉等。可见其用途非常广泛。

黄精用途广泛，用量不断增加，除了药用外，还用于保健品、开发化妆品、作为观赏园林植物等。近年来，野生黄精资源不断减少，市场供不应求，而人工栽培技术还处于野生变家种阶段，运用块茎或种子培育黄精种苗，存活率低，繁殖所需要的时间长，繁殖种苗生长慢，难以达到快速大量繁殖、大批量生产的要求。

黄精的繁殖方式有有性和无性繁殖两种。目前黄精生产上种子繁殖面临的问题是种子发芽率不高，且发芽时间较长，无性繁殖以根茎移栽为主，但其繁殖成本较高；组织培养技术在植物快速繁殖中的应用既可以短时间内生产大量种苗又可降低繁殖的成本，同时建立优良无性系的快速繁殖体系，有利于种质资源的保护及GAP基地的建立，但是到目前为止，关于黄精组织培养的研究较少，多是以腋芽或休眠芽为外植体进行，与叶片相比，腋芽和休眠芽的数量较少，不易获取。

发明内容：

本发明的目的在于，提供一种黄精的组织培养方法。本发明以容易大量获取的叶片为外植体，筛选出来较高愈伤组织诱导、愈伤组织增殖、丛生芽诱导和生根诱导培养基，可使黄精的平均生根率达到66.67％、平均根数高达30条以上、平均根长0.45以上cm、平均根粗1.0mm 以上。可在短时间内为生产提供黄精组培苗。

为解决上述技术问题，本发明采用以下技术方案实现：

一种黄精的组织培养方法，包括以下步骤：A.愈伤诱导培养，B.愈伤增殖 培养，C.丛生芽诱导培养，D.生根培养。

前述的黄精的组织培养方法中，所述步骤A.愈伤诱导培养为：取黄精无菌苗叶片，将其剪为0.5cm*0.5cm的大小的小块，于愈伤诱导培养基中培养40-50天，得诱导出的愈伤组织颗粒；

所述步骤B.愈伤增殖 培养为：将诱导出的愈伤组织颗粒转接到愈伤增殖 培养基中进行增殖 培养50-60天，得增殖 的愈伤组织；

所述步骤C丛生芽诱导培养为：将增殖 的愈伤组织切成0.6cm*0.6cm*0.6cm的小块，小块在丛生芽诱导培养基中进行诱导丛生芽，培养35-45天，直至黄精丛生芽长至2-3cm，得黄精丛生芽；

所述步骤D生根培养为：将黄精丛生芽切开分为单芽，接入生根培养基进行生根培养， 45-55天，即可。