[发明专利]HBV cccDNA的富集提取方法及检测引物组、探针和方法有效
| 申请号： | 201710321005.8 | 申请日： | 2017-05-09 |
| 公开（公告）号： | CN106916908B | 公开（公告）日： | 2018-10-12 |
| 发明（设计）人： | 罗园香;谢丽娟;张晓玮;彭春梅;邓可基;乐小炎;张嘉;李家导;陈观芝;林敏深;林若琳;石壮壮;莫静嫣;李海茵;张新;王星;王法;吴彩虹 | 申请（专利权）人： | 广州海力特生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/6851;C12Q1/6806;C12N15/11;C12N15/10;C12R1/93 |
| 代理公司： | 北京精金石知识产权代理有限公司 11470 | 代理人： | 刘晔 |
| 地址： | 510535 广东省广州*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | hbvcccdna 富集 提取 方法 检测 引物 探针 | ||
1.一种用于检测HBV cccDNA的检测引物组和检测探针，其特征在于：所述的检测引物组为引物组1或引物组2；所述的引物组1由以下4条引物序列组成：引物1：其核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示；引物2：其核苷酸序列如SEQ ID NO：2所示；引物3：其核苷酸序列如SEQID NO：3所示；引物4：其核苷酸序列如SEQ ID NO：4所示；所述的引物组2由以下4条引物序列组成：引物5：其核苷酸序列如SEQ ID NO：5所示；引物6：其核苷酸序列如SEQ ID NO：6所示；引物7：其核苷酸序列如 SEQ ID NO：7所示；引物8：其核苷酸序列如SEQ ID NO：8所示；
所述的检测探针的核苷酸序列为SEQ ID NO：9所示的序列；所述的检测探针的核苷酸序列的5’端标记有荧光基团，所述的荧光基团为FAM、HEX、VIC、CY5和TET中的 一种；所述的检测探针的3’端标记有的淬灭基团，所述的淬灭基团为TAMRA、MGB和BHQ中的一种。
2.如权利要求1所述的检测引物组和检测探针，其特征在于：所述的检测引物组为引物组1；所述的引物组1由以下4条引物序列组成：引物1：其核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示；引物2：其核苷酸序列如SEQ ID NO：2所示；引物3：其核苷酸序列如SEQ ID NO：3所示；引物4：其核苷酸序列如SEQ ID NO：4所示。
3.如权利要求1所述的检测引物组和检测探针，其特征在于：所述的检测引物组为引物组2；所述的引物组2由以下4条引物序列组成：引物5：其核苷酸序列如SEQ ID NO：5所示；引物6：其核苷酸序列如SEQ ID NO：6所示；引物7：其核苷酸序列如SEQ ID NO：7所示；引物8：其核苷酸序列如SEQ ID NO：8所示。
4.一种用于检测HBV cccDNA的试剂盒，其特征在于：所述的试剂盒包括权利要求1-3任意一项所述的检测引物组和检测探针。
5.如权利要求4所述的试剂盒，其特征在于：所述的试剂盒还包括内控引物组和内控探针；所述的内控引物组包括下两条引物：引物9：其核苷酸序列如SEQ ID NO：10所示；引物10：其核苷酸序列如SEQ ID NO：11所示；所述的内控探针的序列为SEQ ID NO：12所示的序列；所述的内控探针的核苷酸序列的5’端标记有荧光基团，所述的荧光基团为FAM、HEX、VIC、CY5和TET中的一种；所述的内控探针的3’端标记有的淬灭基团，所述的淬灭基团为TAMRA、MGB和BHQ中的一种，所述的内控探针上的荧光基团应不同于检测探针上的荧光基团。
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