[发明专利]一种人肝细胞癌发生发展相关的长链非编码RNA、扩增检测方法及应用有效
申请号: | 201710320450.2 | 申请日: | 2017-05-09 |
公开(公告)号: | CN107022625B | 公开(公告)日: | 2020-06-19 |
发明(设计)人: | 彭丽;李官成;蒋斌元;袁小青 | 申请(专利权)人: | 中南大学 |
主分类号: | C12Q1/6886 | 分类号: | C12Q1/6886;C12N15/11;C12N15/113;A61K48/00;A61K31/7088;A61P35/00 |
代理公司: | 长沙正奇专利事务所有限责任公司 43113 | 代理人: | 卢宏;周栋 |
地址: | 410083 湖南*** | 国省代码: | 湖南;43 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 肝细胞 发生 发展 相关 长链非 编码 rna 扩增 检测 方法 应用 | ||
1.一种人肝细胞癌发生发展相关的长链非编码RNA,其特征在于,所述长链非编码RNA的序列如SEQ ID NO.1所示。
2.一种扩增、检测权利要求1所述长链非编码RNA的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒中包含3’RACE引物3L5、3’RACE巢式PCR引物3L5N、5’RACE引物5L5、5’RACE巢式PCR引物5L5N;所述3’RACE引物3L5序列如SEQ ID NO.2所示,所述3’RACE巢式PCR引物3L5N序列如SEQ IDNO.3所示,所述5’RACE引物5L5序列如SEQ ID NO.4所示,所述5’RACE巢式PCR引物5L5N序列如SEQ ID NO.5所示。
3.基于权利要求2所述试剂盒扩增、检测权利要求1所述长链非编码RNA的方法,其特征在于,所述方法包括如下步骤:
(1)以人肝细胞癌HepG2细胞RNA为模板,用3’RACE引物3L5、3’RACE巢式PCR引物3L5N进行PCR获得3’RACE产物;以人肝细胞癌HepG2细胞RNA为模板,用5’RACE引物5L5、5’RACE巢式PCR引物5L5N进行PCR获得5’RACE产物;
(2)将3’RACE产物与5’RACE产物拼接,获得长链非编码RNA。
4.如权利要求1所述长链非编码RNA在制备诊断、治疗或预后预测肝细胞癌试剂或药物中的应用。
5.一种编码权利要求1所述长链非编码RNA的DNA,其特征在于,所述DNA序列如SEQ IDNO.6所示。
6.一种用于权利要求1所述长链非编码RNA中siRNA的作用靶序列,其特征在于,所述靶序列的序列如SEQ ID NO.7至SEQ ID NO.10任一所示。
7.如权利要求6所述的靶序列在制备诊断、治疗或预后预测肝细胞癌疾病的药物中的应用。
8.一种用于权利要求1所述长链非编码RNA中RNAi用的短发夹片段shRNA,其特征在于,所述短发夹片段shRNA的序列如SEQ ID NO.11或SEQ ID NO.12所示。
9.如权利要求8所述的短发夹片段shRNA在制备诊断、治疗或预后预测肝细胞癌疾病的药物中的应用。
10.一种载体或重组子,其特征在于,所述载体或重组子中包含权利要求1、5、6、8任一项所述的序列。
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