[发明专利]用于快速检测犬巴贝西虫的荧光定量PCR引物组合、试剂盒及检测方法有效
| 申请号： | 201710318352.5 | 申请日： | 2017-05-08 |
| 公开（公告）号： | CN106893785B | 公开（公告）日： | 2021-01-08 |
| 发明（设计）人： | 张才;邵琦;王臣;谷文峰;高志峰;爨淑楠;和俊豪;陈小燕;唐正露;邵玉桃;陈文彬;刘彤 | 申请（专利权）人： | 河南科技大学 |
| 主分类号： | C12Q1/6893 | 分类号： | C12Q1/6893;C12Q1/6851;C12N15/11;C12R1/90 |
| 代理公司： | 郑州睿信知识产权代理有限公司 41119 | 代理人： | 牛爱周 |
| 地址： | 471003 河*** | 国省代码： | 河南;41 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 用于 快速 检测 犬巴贝西虫 荧光 定量 pcr 引物 组合 试剂盒 方法 | ||
【权利要求书】：
1.用于快速检测犬巴贝西虫的非疾病诊断目的的方法，其特征在于：包括以下步骤：
（1）以待检测血液样品总DNA为模板，利用荧光定量PCR引物组合进行荧光定量PCR扩增；
（2）利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，通过是否有特异性扩增曲线判断样品中是否含有犬巴贝西虫；
步骤（1）中所述荧光定量PCR引物组合的核苷酸序列如下：
正向引物：5’-TGTTGCAGTTAAAAAGCTCGTAGTTG-3’，
反向引物：5’-TCCATGCTGAAGTATTCAAGACACA-3’；
步骤（1）中所述荧光定量PCR扩增的反应体系为：2×SYBR Master Mix 10.0µL，20µmol/L正、反向引物各0.1µL，模板2µL，去离子水7.8µL，共计20µL；
步骤（1）中所述荧光定量PCR扩增的反应程序为：95℃ 3min，95℃ 15s，60℃ 60s，72℃30s，35个循环。
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