[发明专利]一种用于提高多不饱和脂肪酸产量的复合微生物菌剂

说明书

本发明公开了一种用于提高多不饱和脂肪酸产量的复合微生物菌剂，该复合微生物菌剂由深黄被孢霉、高山被孢霉和卷枝毛霉三种活性菌体细胞和液体培养基组成；其中每毫升复合微生物菌剂中三种活性菌体的细胞总数不少于1×10⁸个，且三种活性菌体细胞数目的配比为(1～5):(1～5):(1～5)；所述液体培养基的配方是：每升自来水中含80g/L葡萄糖、2ml/L大豆油、1g/L玉米淀粉、4g/L酵母浸提物、2g/L硫酸铵，1g/L磷酸二氢钾，1g/L磷酸氢二钾，2g/L柠檬酸钠，2g/L硫酸镁。实验证实，相比于传统的单一菌株发酵，利用本发明所述的复合微生物菌剂发酵相同天数后，生物量和产脂率均有了不同程度的提高，多不饱和脂肪酸的发酵产量也有了明显的提升，工业化应用前景广阔。

技术领域

本发明涉及一种用于提高微生物次级代谢产物发酵产量的复合菌剂，尤其涉及一种用于提高多不饱和脂肪酸产量的液态复合微生物菌剂，属于微生物发酵技术领域。

背景技术

多不饱和脂肪酸(Polyunsaturated fatty acids，PUFAs)是指碳原子数多于或等于18且含有两个或两个以上双键的一类脂肪酸。通常按照第一个双键的位置把多不饱和脂肪酸分为3类：n-3PUFAs，即从甲基端数第1个双键的位置在第3碳位的多不饱和脂肪酸，如二十二碳六烯酸(22:6n-3,DHA)和二十碳五烯酸(20:5n-3,EPA)；n-6PUFAs，指第一个双键的位置在从甲基端数的第6碳位，如花生四烯酸(20:4n-6,AA)和γ-亚麻酸(18:3n-6，GLA)；另外还有第1个双键的位置在第9碳位的n-9类PUFAs。

PUFAs大多数是重要生物活性物质的前体，具有多方面的药用价值和营养价值。PUFAs具有稳定细胞膜功能、降低血中胆固醇和甘油三酯含量、降低血液粘稠度，改善血液微循环、抗心血管疾病、促进机体生长发育，增强记忆力和思维能力等生理功能，而且双键愈多，不饱和程度愈高，营养价值也愈高。目前PUFAs主要来源于深海鱼油及某些植物油。然而，鱼油和植物油资源有限，PUFAs含量低，易受气候、产地等环境条件的影响，而且纯化成本高，在加工过程中容易被氢化。目前的研究方向之一就是寻找能够代谢产生PUFAs的细菌、真菌和藻类等微生物。

目前产PUFAs的微生物多种多样,包括细菌(嗜酸乳杆菌、混浊红球菌、弧菌等)、酵母(弯假丝酵母、浅白色隐球酵母、胶黏红酵母、斯达氏油脂酵母、产油油脂酵母等)、霉菌(深黄被孢霉、高山被孢霉、卷枝毛霉、米曲霉、土曲霉、雅致枝霉、三孢布拉氏霉)和藻类(盐生杜氏藻、粉核小球藻、等鞭金藻、三角褐指藻、新月菱形藻等)。由于细菌产量低，目前对于PUFAs的生产主要集中在真菌和藻类。尤其是真菌，其具有生长周期短，培养简单，产品质量稳定、不受原料、气候、产地的限制，易规模化、产业化生产等优点。真菌中高山被孢霉(Moriterella alpina)、长被孢霉(Mortierella elongata)、水霉(Saprolegnia)、轮枝霉(Diasporangium)、樟疫霉(Phytophthora cinnamomij)、毛霉(Mucor)、小克银汉霉(Cucorcircinelloides)等菌含有EPA、AA，被孢霉(Mortierella)、卷枝毛霉(Mucorcircinelloides)、鲁氏毛霉(Mucor rouxianus)等菌种含有GLA。长被孢霉(Mortierellaelongata)、畸雌腐霉(Pythium irregulare)、破囊壶菌(Thraustochytrium auneum)、终极腐霉(Pythium ultimum)、头孢霉(Cephalosporium)等菌含有EPA、DHA。藻类的培养受外界条件影响较大，用它生产PUFAs有一定难度。真菌在自然界分布广且易培养，所以目前从真菌中寻求高产菌株已成为众多研究者关心的问题，且前景可期。但检索发现，目前利用真菌发酵生产多不饱和脂肪酸的研究大多集中在利用单一菌株进行发酵，而利用功能菌株混合制成的复合菌剂发酵生产多不饱和脂肪酸的研究却未见相关报道。

发明内容