[发明专利]一种雪松松针中同时制备莽草酸和总黄酮的方法

说明书

本发明涉及一种雪松松针中同时制备莽草酸和总黄酮的方法，该方法包括以下步骤：⑴将新采集的雪松松针凉干后经回流提取、过滤，得雪松松针水提液；⑵雪松松针水提液经减压浓缩、醇沉，即得雪松松针醇沉液；⑶雪松松针醇沉液经减压回收得流浸膏；⑷流浸膏经超声溶解，得雪松松针莽草酸和总黄酮粗提液；⑸将雪松松针莽草酸和总黄酮粗提液上大孔吸附树脂，得未吸附流出液；大孔吸附树脂柱洗脱，得水洗液；水洗后的大孔吸附树脂柱经乙醇洗柱，得乙醇洗脱液；⑹合并未吸附流出液和水洗液，经减压蒸干、超声溶解、淋洗、减压蒸干、重结晶得莽草酸产品；⑺乙醇洗脱液经减压蒸干，得雪松松针总黄酮。本发明方法简单、快速、重复性好，易于实施工业化生产。

技术领域

本发明涉及中药、天然药物制药领域，尤其涉及一种雪松松针中同时制备莽草酸和总黄酮的方法。

背景技术

松针为松科植物的多个品种的针状叶，全世界松科植物共有10个属230余种，我国松树有10个属120余种，雪松是可供药用的13种松树之一（刘东彦,石晓峰《药用松针的研究进展·中药材》,2012,35 (10): 1701），其针叶药用历史悠久，主要化学成分为黄酮类、苯丙素类、有机酸类、三萜类、甾体类、多糖及针叶胶等，具有抗肿瘤、抗氧化、改善记忆、抗菌及抗病毒、毒杀蚊虫等多种功效（白朝辉,石晓峰,刘东彦,等《雪松松针的化学成分及药理作用研究进展·中国药师》, 2012,15(12):1791）。经前期对雪松松针化学成分的系统研究发现，雪松松针中含有大量的莽草酸（王东东,石晓峰,李冲,等《7种松柏科植物中莽草酸的含量测定·中国药房》,2011, 22(7):616-618. 沈薇,石晓峰,王东东,等《正交试验优选雪松松针中莽草酸的提取工艺·中国现代应用药学杂志》,2011,28(10):831-834.）和黄酮类化合物（刘东彦,石晓峰,王东东,等《雪松松针黄酮类化学成分的研究·中草药》,2011,42(4): 631-633；Liu DY,Shi XF, Wang DD, et al《A New Flavonoid In Pine Needles OfCedrus Deodara·Chinese Herbal Medicines》,2011,3(1):5-6.；Liu DY,Shi XF, WangDD, et al《Two New Myricetin Glycosides from Pine Needles of Cedrus deodara ·Chemistry of Natural compound》, 2011, 47(5):704-707；刘东彦,石晓峰,李冲,等《雪松松针醋酸乙酯部位化学成分研究·中草药》，2011,42(10): 1921-1924）。而文献报道莽草酸具有抗肿瘤和对心脑血管的作用，是抗禽流感药达菲的主要合成原料（张军民,石晓峰《天然产物莽草酸的研究进展·中国中医药信息杂志》, 2011, 18(2):109-112.）；黄酮类化合物是高效、天然、毒副作用较小的抗肿瘤药物，还具消炎、抑菌、降血脂和防衰老等多种生物功效（李湘洲,栾芳菲,张胜,等《黄酮类化合物的抗肿瘤和抗血管生成作用研究进展·食品与机械》,2016,32(1):199-201.），研究发现雪松松针总黄酮对人宫颈癌HeLa细胞株、人胃癌MKN45细胞株、人肺癌A549细胞株、人肝癌HepG2细胞株及人胶质瘤SHG44细胞株均有选择性抑制作用，且对HepG2细胞增殖抑制作用最显著，当雪松松针总黄酮浓度为100 µg/mL时，对其抑制率为(50.94±6.11) %（Xiaofeng Shi, Dongyan Liu, Junmin Zhang,etal . 《Extraction and purification of totalflavonoids from pine needles ofCedrus deodara contribute to anti-tumor in vitro. BMC Complementary andAlternative Medicine 》,2016,16.245-253）。目前，对于雪松松针中莽草酸和总黄酮的制备，除了《从雪松松针中提取、分离、纯化莽草酸的生产工艺》（专利申请号：201010174776.7）和《一种雪松松针总黄酮的富集方法及其在抗肿瘤中的应用》（专利申请号：201511007948.0），未见雪松松针中同时制备莽草酸和总黄酮的方法的相关报道。