[发明专利]一种检测银杏叶提取液中总银杏酸的方法

权利要求书

1.一种检测银杏叶提取液中总银杏酸的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

1)取待测银杏叶提取液，加工成粉末，得供试品；以甲醇水溶液为溶剂充分溶解，过滤，取滤液，即得供试品溶液；

2)取白果新酸对照品，以甲醇水溶液为溶剂溶解，即得对照品溶液；

3)采用高效液相色谱法，分别对所述供试品溶液和对照品溶液进行检测，分别获得供试品色图谱和对照品色谱图；所述检测的条件具体为：

色谱柱填充剂为十八烷基硅烷键合硅胶；流动相由流动相A和流动相B组成，其中，含0.1％-0.2％三氟乙酸的乙腈为流动相A，0.1％-0.2％三氟乙酸的水溶液为流动相B；按如下条件进行梯度洗脱：

0～35min：流动相A占流动相总体积的百分比由75％增加至90％；

35～36min：流动相A占流动相总体积的百分比为90％；

36～45min：流动相A占流动相总体积的百分比为90％减少至75％；

4)依据所述对照品色谱图与所述供试品色谱图中各自的银杏酸峰面积，采用外标法计算所述待测银杏叶提取液中总银杏酸的含量。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述银杏叶提取液的制备方法为：用乙醇提取银杏叶，树脂吸附，乙醇洗脱，回收乙醇，水稀释，即得；

优选地，所述银杏叶提取液的制备方法为：银杏叶采用乙醇回流提取，回收乙醇，加水定容，采用树脂吸附，乙醇洗脱，过滤取滤液，回收乙醇，浓缩、醇沉、滤过，回收乙醇，加水稀释，即得。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述甲醇为体积百分比浓度70％-90％的甲醇水溶液，优选为80％的甲醇水溶液。

4.根据权利要求1-3任一所述的方法，其特征在于，还包括制备定位用对照品溶液，制备所述定位用对照品溶液具体为：取总银杏酸对照品，以甲醇水溶液为溶剂溶解，即得；

采用步骤3)所述高效液相色谱法检测所述定位用对照品溶液，获得定位用对照品色谱图；

步骤4)依据所述对照品色谱图、所述供试品色谱图以及所述定位用对照品色谱图中各自的银杏酸峰及峰面积，采用外标法计算所述待测银杏叶提取液中总银杏酸的含量；

优选地，步骤4)依据所述定位用对照品色谱图，确定所述供试品色谱图中总银杏酸峰。

5.根据权利要求1-4任一所述的方法，其特征在于，采用高效液相色谱法时，所述供试品溶液与所述对照品溶液的进样量均为50μl。

6.根据权利要求1-5任一所述的方法，其特征在于，所述步骤1)所述加工采用喷雾干燥法。

7.根据权利要求1-6任一所述的方法，其特征在于，步骤3)所述检测条件还包括：检测波长220nm-240nm、300nm-320nm；和/或，柱温为25℃-35℃；和/或，流速为0.8-1.2mL/min。

8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述检测波长为310nm；和/或，所述柱温为30℃。

9.根据权利要求1-8任一所述的方法，其特征在于，步骤3)所述色谱柱尺寸为：柱长150mm-200mm、250mm，柱内径4mm-5mm；和/或，所述填充剂的粒径为3.5-5μm；

优选地，所述柱长为150mm，柱内径4.6mm；和/或，所述填充剂的粒径为5μm。

10.根据权利要求1-9任一项所述的方法，其他特征在于，所述方法包括以下步骤：

1)取待测银杏叶提取液，采用喷雾干燥法加工成粉末，得供试品；以百分比为70％～90％的甲醇水溶液为溶剂充分溶解，过滤，取滤液，即得供试品溶液；

2)取白果新酸对照品，以百分比为70％～90％的甲醇水溶液为溶剂溶解，即得对照品溶液；取总银杏酸对照品，以百分比为70％～90％的甲醇水溶液为溶剂溶解，即得定位用对照品溶液；

3)采用高效液相色谱法，分别对所述供试品溶液、对照品溶液及定位用对照品溶液进行检测，分别获得供试品色图谱、对照品色谱图及定位用对照品色谱图；所述检测的条件具体为：

色谱柱填充剂为十八烷基硅烷键合硅胶；流动相由流动相A和流动相B组成，其中，含0.1％-0.2％三氟乙酸的乙腈为流动相A，0.1％-0.2％三氟乙酸的水溶液为流动相B；按如下条件进行梯度洗脱：

0～35min：流动相A占流动相总体积的百分比由75％增加至90％；

35～36min：流动相A占流动相总体积的百分比为90％；

36～45min：流动相A占流动相总体积的百分比为90％减少至75％；

所述检测波长为310nm；所述柱温为30℃；所述柱长为150mm，柱内径4.6mm；所述填充剂的粒径为5μm；

4)依据所述定位用对照品色谱图与供试品色谱图，确定供试品色谱图总银杏酸峰及其峰面积，再与对照品色谱图中白果新酸峰面积比较，采用外标法计算所述待测银杏叶提取液中总银杏酸的含量。