[发明专利]一种蛋白自组装新型纳米疫苗及其制备方法

权利要求书

1.一种蛋白自组装新型纳米疫苗，其特征在于，该疫苗仅包含抗原蛋白和免疫佐剂，不使用化学交联剂和纳米载体，该疫苗的抗原蛋白质量占比93%，免疫佐剂占比7%；所述的抗原蛋白为肿瘤模式抗原OVA，所述的免疫佐剂为巯基修饰的寡核苷酸SH-CpG；

所述的蛋白自组装新型纳米疫苗的制备方法，采用以下步骤：将OVA溶于MES缓冲液中，过滤或离心除去絮状不溶物，得到抗原蛋白体系，向抗原蛋白体系中加入质量分数为6%的十二烷基硫酸钠水溶液，搅拌均匀后，滴加无酶水溶解的巯基修饰的寡核苷酸SH-CpG，搅拌，混合均匀，密封，搅拌加热，反应完毕后，将反应溶液置于冰水浴中，使反应快速终止，除去体系内的杂质及未反应的组分，得到提纯浓缩的纳米疫苗；

所述的OVA与巯基修饰的寡核苷酸SH-CpG的质量比为10:1；

OVA与十二烷基硫酸钠水溶液的用量之比为6mg:50μL；

所述的缓冲液的浓度在0.01M-0.2M之间，pH为3.0~6.0；

加热的温度为80℃-100℃。

2.根据权利要求1所述的一种蛋白自组装新型纳米疫苗，其特征在于，该疫苗的平均粒径在20-500 nm。

3.根据权利要求1所述的一种蛋白自组装新型纳米疫苗，其特征在于，该疫苗具有还原敏感性。

4.一种蛋白自组装新型纳米疫苗的制备方法，其特征在于，该方法采用以下步骤：

将OVA溶于MES缓冲液中，过滤或离心除去絮状不溶物，得到抗原蛋白体系，向抗原蛋白体系中加入质量分数为6%的十二烷基硫酸钠水溶液，搅拌均匀后，滴加无酶水溶解的巯基修饰的寡核苷酸SH-CpG，搅拌，混合均匀，密封，搅拌加热，反应完毕后，将反应溶液置于冰水浴中，使反应快速终止，除去体系内的杂质及未反应的组分，得到提纯浓缩的纳米疫苗；

所述的OVA与巯基修饰的寡核苷酸SH-CpG的质量比为10:1；

OVA与十二烷基硫酸钠水溶液的用量之比为6mg:50μL；

所述的缓冲液的浓度在0.01M-0.2M之间，pH为3.0~6.0；

加热的温度为80℃-100℃。

5.根据权利要求4所述的一种蛋白自组装新型纳米疫苗的制备方法，其特征在于，提纯浓缩的纳米疫苗经脱水制备成疫苗制剂。

6.根据权利要求5所述的一种蛋白自组装新型纳米疫苗的制备方法，其特征在于，脱水采用冻干、减压蒸馏或喷雾干燥。