[发明专利]毛发中可卡因类物质的提取和检测方法

说明书

本发明涉及一种毛发中可卡因类物质的提取和检测方法。该提取方法包括以下步骤：（1）将毛发清洗后，用液氮研磨，得毛发粉末；（2）取研磨后的毛发粉末加入复合处理液，进行超声处理，离心，取上清液加入磷酸缓冲液A进行缓冲，得毛发预处理液；所述复合处理液为含有牛血清蛋白和吐温的磷酸缓冲溶液B；（3）将毛发预处理液注入经平衡后的固相萃取柱，依次用水、盐酸溶液、甲醇和乙酸乙酯洗涤杂质，再用二氯甲烷、甲醇和氨水的混合溶液进行洗脱，收集洗脱液，即得。将收集的洗脱液用LC‑MS/MS的方法进行检测，即可有效检测出毛发中含量甚微的可卡因类物质。该提取和检测方法操作简单，条件温和，释放效率高，检测灵敏度高。

技术领域

本发明涉及生物医药检测技术，特别是涉及一种毛发中可卡因类物质的提取和检测方法。

背景技术

近年来，毛发类的检材因其反应滥用药物信息较全面，为了确认检查对象是否吸毒以及摄毒程度，该类检材经常作为司法鉴定和法庭科学的证据，也被广泛应用于临床毒物学、兴奋剂控制等其他领域。

毛发中成分复杂，存在大量有机成分的干扰物质，为检测毛发中的可卡因及其体内代谢物苯甲酰爱康宁，须建立特异性较强的前处理方法分离提取目标物。因可卡因和苯甲酰爱康宁和黑色头发的结合程度较高，需采取较为苛刻的前处理条件来释放毛发中这两种成分。现有技术中，毛发中毒品检测通常采用酸水解、碱水解、酶水解等方法进行提取，水解时间较长，时效性较差。

比如，沈敏等开发了一种头发中毒品及代谢物的筛选分析方法：毛发样本经洗涤后用0.1mol·L^-1的盐酸溶液2mL，在45℃水浴中水解过夜，取出，冷却后调节pH值约为9，用乙酸乙酯提取，取有机层加入酸性甲醇吹干，用MSTFA微波衍生化，供GCMS分析。[沈敏,沈保华,向平.GC/MS/MS法在头发中毒品及代谢物的筛选分析中的应用[J].质谱学报,2002,23(1):11-11]。该方法酸水解时间太长，时效性较差；使用气质联用法检测灵敏度不高。

发明内容

基于此，本发明提供了一种毛发中可卡因类物质的提取方法，该提取方法条件较为温和，提取时间短，提取效率高，特异性强。

具体技术方案如下：

一种毛发中可卡因类物质的提取方法，包括以下步骤：

(1)将毛发清洗后，用液氮研磨，得毛发粉末；

(2)取研磨后的毛发粉末加入复合处理液，进行超声处理，离心，取上清液加入磷酸缓冲液A进行缓冲，得毛发预处理液；所述复合处理液为含有牛血清蛋白和吐温的磷酸缓冲溶液B；

(3)将毛发预处理液注入经平衡后的固相萃取柱，依次用水、盐酸溶液、甲醇和乙酸乙酯洗涤杂质，再用二氯甲烷、甲醇和氨水的混合溶液进行洗脱，收集洗脱液，即得。

在其中一些实施例中，步骤(2)所述的复合处理液为0.05-0.5mol/L的磷酸缓冲溶液B，并且含有1-5％的牛血清蛋白和0.05-0.15％的吐温，且pH值为2-3。

在其中一些实施例中，步骤(2)所述复合处理液与所述毛发粉末的配比为1mL:5～8g。

在其中一些实施例中，步骤(2)所述超声处理的温度为37～80℃，时间为1.5～12h。

在其中一些实施例中，步骤(2)所述超声处理的温度为65～75℃，时间为2～4h。

在其中一些实施例中，步骤(2)所述磷酸缓冲液A的pH为5.5-6.5。

在其中一些实施例中，步骤(2)所述磷酸缓冲液A与所述上清液的体积比为1:2.5～3.5。

在其中一些实施例中，步骤(3)所述固相萃取柱依次经过甲醇、磷酸缓冲液C进行平衡，所述磷酸缓冲液C的pH为5.0～7.0。