[发明专利]一种提高迷力菌类胡萝卜素产量的摇瓶‑静置液体发酵方法

说明书

技术领域

本发明涉及迷力菌人工培育技术领域，更具体地，涉及一种提高迷力菌类胡萝卜素产量的液体发酵方法。

背景技术

在传统中药中，部分虫草菌，如冬虫夏草、迷力菌、大团囊虫草等，它们与寄主的复合体常常可以直接入药。冬虫夏草作为我国传统的名贵中药材，迄今为止，人们仍然没有实现冬虫夏草的规模化人工培养。尤其是近些年来，随着市场价格不断上涨，冬虫夏草被过渡开采，其野生资源不断减少，已经被列入“国家二级保护物种”。

在药用价值方面，迷力菌与冬虫夏草十分类似，含有诸如虫草酸、虫草素、虫草多糖、甾类、甘露醇和超氧化物歧化酶(SOD)等生物活性物质。迷力菌还含有17种氨基酸，总蛋白质含量高达30%，其中35.47%为必需氨基酸。另外，迷力菌还含有V_A、V_D、V_E、V_C、V_B1、V_B2和V_B6等多种维生素。此外，与冬虫夏草要求“苛刻”的生长环境不同，迷力菌不仅生长更快，而且易于人工培养。

迷力菌具有免疫系统调节、抗肿瘤、抗氧化、抗衰老、降血糖、镇静、催眠和调节内分泌系统等功效。新近研究表明迷力菌含有稀少的水溶性类胡萝卜素，具有独特的生理价值。

迷力菌作为一种珍贵的食药用真菌，目前为止对其活性成分的研究多集中于虫草素、虫草酸、虫草多糖、腺苷和超氧化物歧化酶等。自付鸣佳首次对迷力菌产类胡萝卜素的特性进行了研究报道和Dong首次证实了迷力菌中的类胡萝卜素大部分是水溶性强的北虫草黄素以来，对于迷力菌类胡萝卜素的研究还是相对较少。

类胡萝卜素是由类异戊二烯单位组成的碳氢化合物及其氧化衍生物的总称，具有抗炎、抗癌、抗氧化等的功能效力，现今发现的类胡萝卜素绝大部分是脂溶性的类胡萝卜素，人体难以直接吸收利用且大部分遇光和热不稳定。迷力菌类胡萝卜素作为迄今为止发现的一类罕见的水溶性类胡萝卜素，与传统的类胡萝卜素相比，其理论上应该具有更强的潜在生理活性，故对其开发应用是当前亟待解决的问题。

现如今，对迷力菌所含类胡萝卜素的研究已经日益增多，但绝大部分仍处于提取、鉴定等阶段，而对如何提高类胡萝卜素的含量鲜有报道。

液体发酵较为适宜工业化大规模生产，原料简单，容易操作并且相对于固体发酵来说培养周期较短。但是目前液体发酵应用于迷力菌时，光照强度要求高但其发酵后类胡萝卜素产量较低，并且产量不稳定，源于发酵过程中的机制和关键因素研究不够。目前未见关于有针对性地提高迷力菌类胡萝卜素产量的迷力菌的液体发酵方法相关技术报道。

发明内容

本发明要解决的技术问题在于克服现有迷力菌液体发酵处理中类胡萝卜素产量不高的技术不足，提供一种新的提高迷力菌中类胡萝卜素产量的摇瓶-静置液体发酵方法。相比于普通的摇瓶法液体发酵方法，本发明更节能，并且对于提高迷力菌类胡萝卜素产量具有意想不到的突出效果。

本发明的目的通过以下技术方案予以实现：

提供一种提高迷力菌类胡萝卜素产量的摇瓶-静置两步液体发酵方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

S1.活化菌种：将保存的原始菌株接种到固体平板培养基上，黑暗培养至菌丝长满培养皿，光照培养使其转色，得到活化的母种；

S2.二级活化：接种步骤S1所述活化的母种接种于液体培养基中黑暗摇瓶4～5天，得到活化的液体种子；

S3.液体发酵：按接种量5%将步骤S2所述液体种子接种于发酵培养基中，150rpm，25℃黑暗摇瓶发酵4或6天；

S4.静置培养：将步骤S3所述培养基倒入平板，光照静置培养10或12天；

优选地，步骤S4所述培养基倒入平板中的倒入量为100 mL或120mL，所述平板规格为：R=11.5cm，h=2.3cm。

优选地，步骤S4所述所述光照培养的光照强度为：500lux。

优选地，步骤S3所述发酵培养基的配方：大米粉1.2%，玉米粉0.6%，大豆粉0.3%，MgSO₄·7H₂O 0.1g，KH₂PO₄ 0.1g，VB₁ 0.001g；

优选地，所述培养基121℃灭菌30min后备用。

进一步地，步骤S3所述黑暗摇瓶发酵天数为4或6天。

本发明的有益效果：