[发明专利]用于生产糖蛋白的动物细胞株及方法、糖蛋白及其用途有效
| 申请号: | 201710293579.9 | 申请日: | 2017-04-28 |
| 公开(公告)号: | CN108795871B | 公开(公告)日: | 2021-12-03 |
| 发明(设计)人: | 藤田盛久;金则成;喜多岛敏彦;张慧杰;高晓冬 | 申请(专利权)人: | 江南大学 |
| 主分类号: | C12N5/10 | 分类号: | C12N5/10;C12N9/20;C12N9/40;C07K16/00;A61K38/47;A61K38/46;A61P3/00 |
| 代理公司: | 北京永新同创知识产权代理有限公司 11376 | 代理人: | 钟胜光 |
| 地址: | 214122 江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 用于 生产 糖蛋白 动物 细胞株 方法 及其 用途 | ||
1.一种用于生产以高甘露糖型糖链为主要N-糖链结构的糖蛋白的动物细胞株,其特征在于,所述细胞株的高尔基体甘露糖苷酶基因I基因MAN1A1和MAN1A2被敲除。
2.根据权利要求1所述的动物细胞株,其中,所述细胞株的内质网甘露糖苷酶基因MAN1B1进一步被敲除。
3.根据权利要求1或2所述的动物细胞株,其中,所述高甘露糖型糖链为选自Glc1-Man9-GlcNAc2、Man9-GlcNAc2、Man8-GlcNAc2、Man7-GlcNAc2、Man6-GlcNAc2和Man5-GlcNAc2中的至少一种。
4.根据权利要求1或2所述的动物细胞株,其中,所述细胞株来自选自人胚肾细胞HEK293、中国仓鼠卵巢细胞CHO、COS、3T3、myeloma、BHK、HeLa、Vero中的哺乳动物细胞、或者选自爪蟾卵子细胞或昆虫细胞Sf9、Sf21、Tn5中的两栖类动物细胞。
5.根据权利要求4所述的动物细胞株,其中,所述细胞株来自人胚肾细胞HEK293或中国仓鼠卵巢细胞CHO。
6.根据权利要求1所述的动物细胞株,其中,所述细胞株为MAN1A1/A2基因双敲除细胞株A1/A2–double-KO,保藏号为CCTCC No:C201767。
7.根据权利要求2所述的动物细胞株,其中,所述细胞株为MAN1A1/A2/B1基因三敲除细胞株A1/A2/B1-triple-KO,保藏号为CCTCC No:C2016193。
8.根据权利要求1或2所述的动物细胞株,其中,所述糖蛋白为人α-半乳糖苷酶或人溶酶体脂肪酶。
9.一种生产以高甘露糖型糖链为主要N-糖链结构的糖蛋白的方法,其特征在于,使用权利要求1~8中任一项所述的动物细胞株。
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