[发明专利]一种绿藻多糖及其制备方法

权利要求书

1.一种绿藻多糖，其特征在于，

所述绿藻多糖是由鼠李糖和葡萄糖醛酸组成的一种硫酸多糖，其中，鼠李糖的摩尔百分比为96.12%，葡萄糖醛酸的摩尔百分比为3.88%；所述绿藻多糖的主链由α-L-(1,3)-连接的鼠李糖和α-L-(1,2)-连接的鼠李糖组成，α-L-(1,3)-连接的鼠李糖和α-L-(1,2)-连接的鼠李糖的摩尔比为5：3，在α-L-(1,3)-连接的鼠李糖的C2位存在支链；所述绿藻多糖的支链由α-L-(1,3)-连接的鼠李糖和末端连接的β-D-葡萄糖醛酸组成，β-D-葡萄糖醛酸位于支链的非还原端，β-D-葡萄糖醛酸与鼠李糖之间以1,3糖苷键连接；所述绿藻多糖的结构分子式如式Ⅰ所示，其中，n=30，m=0-5， R₁=H 或SO₃H，R₂=H 或SO₃H，R₃=H 或SO₃H，R₄=H 或SO₃H；

式I。

2.如权利要求1所述的绿藻多糖，其特征在于，

所述绿藻多糖的平均分子量为58.4千道尔顿。

3.如权利要求1所述的绿藻多糖，其特征在于，

17.77 %的α-L-(1,3)-连接的鼠李糖被硫酸化形成硫酸基并位于α-L-(1,3)-连接的鼠李糖的C2位，4.15%的α-L-(1,2)-连接的鼠李糖被硫酸化形成硫酸基并位于α-L-(1,2)-连接的鼠李糖的C3位。

4.如权利要求1所述的绿藻多糖，其特征在于，

在所述绿藻多糖的糖链中，每10个鼠李糖基中存在一个支链。

5.一种如权利要求1-4中任一项所述的绿藻多糖的制备方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：

（1）向干燥的袋礁膜中加水浸泡形成匀浆，在20℃-24℃下提取0.5-4小时，分离出清液；其中，水的质量为袋礁膜质量的10-60倍；

（2）将所得清液减压浓缩、脱盐得到第一多糖溶液，将所述第一多糖溶液减压浓缩、干燥得到多糖，将所述多糖加水溶解得到第二多糖溶液，所述第二多糖溶液中所述多糖的质量分数为0.1%-6%；

（3）将所述第二多糖溶液通过离子交换色谱柱分离和凝胶色谱柱分离，然后减压浓缩、脱盐，将脱盐后的溶液减压浓缩、干燥，得到所述绿藻多糖。

6.如权利要求5所述的绿藻多糖的制备方法，其特征在于，

所述步骤（1）中，向干燥的袋礁膜中加水浸泡形成匀浆的方法为：将干燥的袋礁膜直接浸泡于水中形成匀浆，或者将干燥的袋礁膜研磨或绞碎后与水混合形成匀浆，或者将干燥的袋礁膜加工成干燥粉末与水混合形成匀浆。

7.如权利要求5所述的绿藻多糖的制备方法，其特征在于，

所述步骤（2）和所述步骤（3）中，脱盐的方法为透析脱盐。

8.如权利要求5所述的绿藻多糖的制备方法，其特征在于，

所述步骤（2）和所述步骤（3）中，干燥的方法为冷冻干燥，或者向减压浓缩后的多糖溶液中加入1-6倍多糖溶液体积的、质量分数为95%乙醇使多糖沉淀，将所得沉淀在40℃-80℃烘箱中干燥0. 1-6 小时。

9.如权利要求5所述的绿藻多糖的制备方法，其特征在于，

所述步骤（3）中，所述离子交换色谱柱为色谱柱Q Sepharose Fast Flow，依次用蒸馏水、0.5 mol/L氯化钠水溶液、1.0 mol/L氯化钠水溶液、1.5 mol/L氯化钠水溶液和2.0mol/L氯化钠水溶液洗脱。

10.如权利要求5所述的绿藻多糖的制备方法，其特征在于，

所述步骤（3）中，所述凝胶色谱柱为色谱柱Sephacryl S-400 HR，所用的洗脱液为0.2mol/L碳酸氢铵水溶液。