[发明专利]一种检测鸡CDS2基因3’-UTR变异的方法有效
| 申请号: | 201710288071.X | 申请日: | 2017-04-27 |
| 公开(公告)号: | CN107099587B | 公开(公告)日: | 2020-05-15 |
| 发明(设计)人: | 黄艳群;徐媛媛;陶亚飞;陈文 | 申请(专利权)人: | 河南农业大学 |
| 主分类号: | C12Q1/6858 | 分类号: | C12Q1/6858;C12Q1/6888;C12Q1/48 |
| 代理公司: | 郑州优盾知识产权代理有限公司 41125 | 代理人: | 孙诗雨;张真真 |
| 地址: | 450002 河*** | 国省代码: | 河南;41 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 检测 cds2 基因 utr 变异 方法 | ||
1.一种检测鸡CDS2基因3’-UTR变异的方法,其特征在于,步骤如下:
(1)资源群体样品的准备;
(2)样品基因组DNA的提取;
(3)DNA混合池的构建;
(4)引物的设计;
(5)3’-UTR变异的检测;
(6)统计检测结果并进行基因型判断;
所述步骤(4)中,引物为检测变异位点的引物对LP5-F和LP5-R,其中LP5-F序列如SEQID NO:1所示,LP5-R序列如SEQ ID NO:2所示。
2.如权利要求1所述的检测鸡CDS2基因3’-UTR变异的方法,其特征在于:所述步骤(1)的操作为,采用正交试验法,正交系4个、反交系3个,F0代是从蛋肉兼用型固始鸡和肉用型安卡红鸡纯系中分别选取种鸡,按公母鸡1∶6 比例配组而成;从每个家系的 F1后代中选留1只公鸡,每只公鸡分别按公母鸡1∶9 比例与选留公鸡不同的F1代家系的F1代母鸡交配,产生F2代,以F2代个体为样品。
3.如权利要求1所述的检测鸡CDS2基因3’-UTR变异的方法,其特征在于:所述步骤(2)的操作为,采用酚氯仿抽提法从F2代个体样品的血液中提取基因组DNA。
4.如权利要求1所述的检测鸡CDS2基因3’-UTR变异的方法,其特征在于:所述步骤(3)的操作为,选取100个不同个体的F2代样品的DNA,每个样品的DNA取2μL,充分混匀即可完成DNA混合池的制备。
5.如权利要求1所述的检测鸡CDS2基因3’-UTR变异的方法,其特征在于:所述步骤(5)中,3’-UTR变异的检测包括PCR产物检测和酶切片段检测;
所述酶切片段检测采用的酶切引物对为LP6-F和LP6-R,其中LP6-F序列如SEQ ID NO:3所示,LP6-R序列如SEQ ID NO:4所示。
6.权利要求1-5任一项所述的方法在鸡的育种中利用基因型进行鸡的体重选择的应用。
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