[发明专利]重组大肠杆菌发酵产物中L-哌啶酸的分离提纯方法

权利要求书

1.重组大肠杆菌发酵产物中L-哌啶酸的分离提纯方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)待分离样品处理：取发酵原液，加入吸附剂充分混匀后加热搅拌，再经滤纸、硅藻土和滤膜过滤，得澄清溶液；所述发酵原液中L-哌啶酸浓度为10～60g/L，pH值为2～10；所述发酵原液中含有锌、钾、钠、铵、铁、铜、镁阳离子，含有磷酸根、硫酸根、氯离子阴离子，还含有葡萄糖、赖氨酸、柠檬酸有机成分；

2)杂质去除：将步骤1)所述的澄清溶液，加入溶剂后充分混匀，再经静置、离心，取上清液；

3)溶析结晶：将步骤2)所述的上清液调节pH值至6.0～6.5，加入丙酮静置溶析，离心后析出白色晶体后进行抽滤烘干，得针状晶体L-哌啶酸，抽滤得到的滤液循环到下一次溶析结晶。

2.根据权利要求1所述的分离提纯方法，其特征在于，步骤1)中加热搅拌的速率为1000～1500r/min，加热温度为40～80℃，加热搅拌时间为0.67～1.5h。

3.根据权利要求1所述的分离提纯方法，其特征在于，步骤1)中滤膜过滤为至少一次0.2～0.8μm滤膜过滤。

4.根据权利要求3所述的分离提纯方法，其特征在于，步骤1)中滤膜过滤为依次经0.8μm滤膜、0.45μm滤膜过滤。

5.根据权利要求1所述的分离提纯方法，其特征在于，步骤2)中溶剂包括无水乙醇、甲醇、丙醇和乙二醇的一种或多种。

6.根据权利要求1所述的分离提纯方法，其特征在于，步骤2)所述溶剂与所述澄清溶液的体积比为1：1～1：2。

7.根据权利要求1所述的分离提纯方法，其特征在于，步骤2)中静置的时间为3～8min，离心条件为3500～4500r/min，10～25℃，5～10min。

8.根据权利要求1所述的分离提纯方法，其特征在于，步骤3)中丙酮与上清液是体积比为2:3～2:13。

9.根据权利要求1所述的分离提纯方法，其特征在于，步骤3)中静置时间为5～15min，离心条件为3500～4500r/min，10～25℃，5～10min。