[发明专利]一种制备具有体外抗氧化活性的铁皮石斛低聚糖的方法

说明书

本发明属于铁皮石斛加工领域，具体涉及一种制备具有体外抗氧化活性的铁皮石斛低聚糖的方法。本发明利用酶解法制备铁皮石斛低聚糖。该方法简单，可实施行强，制备得到的铁皮石斛低聚糖的DPPH清除率可达23.7%，总抗氧化活性可达0.65 U/mL。

技术领域

本发明属于铁皮石斛加工领域，具体涉及一种制备具有体外抗氧化活性的铁皮石斛低聚糖的方法。

背景技术

铁皮石斛是兰科石斛属气生兰科的名贵药用草本植物，具有益胃生津、滋阴清热、润肺止咳、延年益寿等功效及增强免疫力、抗氧化、降血糖、降血脂、防癌抗癌等神奇的功效。铁皮石斛的传统加工仍以石斛鲜条、铁皮枫斗、石斛超微粉等粗放型为主。我国铁皮石斛精深加工业的发展速度相当缓慢，且缺乏技术的深度创新，已难以适应现代铁皮石斛种植业的发展。因此，如何推动铁皮石斛精深加工业发展是目前亟待解决的关键问题之一。石斛茎中含有多种生物碱、多糖、氨基酸及淀粉等。石斛多糖属于活性多糖的一种，具有抗炎、抗病毒、修复自身提高免疫力的功效，一直被选作铁皮石斛深加工研究的主要对象，包括多糖的提取、结构分离及活性功能评价等，而将铁皮石斛多糖降解成为小分子低聚糖的研究较少。众所周知，低聚糖也具有抗氧化、抗肿瘤、降血糖及提高免疫力等功效，且有研究证实某些特殊结构的低聚糖功能性强于活性多糖，而且专一性更高、可吸收性更好等特点。因此，借助铁皮石斛中重要的活性多糖成分制备小分子低聚糖，是提升铁皮石斛多糖应用层次的新思路，有望推动铁皮石斛精深加工业发展，具有现实意义。

发明内容

针对上述问题，本发明提供了一种制备具有体外抗氧化活性的铁皮石斛低聚糖的方法。本发明通过酶解法制备了铁皮石斛低聚糖，提高了铁皮石斛的抗氧化活性。

本发明是通过以下技术方案实现的：

一种制备具有体外抗氧化活性的铁皮石斛低聚糖的方法，所述方法利用酶直接酶解铁皮石斛制备铁皮石斛低聚糖。

所述方法包括以下步骤：

磨粉：将铁皮石斛鲜条放置于烘箱中烘干后用万能粉碎机破碎，并过60目分离筛得铁皮石斛干粉备用；

溶解：将铁皮石斛干粉溶解在磷酸盐缓冲液中得铁皮石斛干粉液，浓度为g/ml；

限制性酶解：向铁皮石斛干粉液中加入一定量酶制剂酶解一段时间后得酶解液；

灭酶：将酶解液100～150℃灭菌时间4～10min，使剩余酶制剂失去活性；

过滤：将灭酶后的酶解液5000～10000rpm离心5～10min取上清液；

浓缩：将上清液浓缩10-100倍得铁皮石斛低聚糖。

所述酶解中，酶为β-甘露聚糖酶与纤维素酶复配的复合酶，β-甘露聚糖酶与纤维素酶的配比为2:1，复合酶添加量为12U/mL，酶解温度为40℃，酶解pH值为6.0，酶解时间为8h。

所述方法制备得到的铁皮石斛低聚糖的DPPH清除率可达23.7％，总抗氧化活性可达0.65U/mL。

所述方法制备得到的铁皮石斛低聚糖是以低聚甘露糖为主的低聚糖混合物。

所述酶选自甘露聚糖酶、纤维素酶、纤维二糖酶、葡聚糖酶、木聚糖酶中的至少一种。

所述酶解中，酶的添加量为1U/mL-20U/mL。

所述酶解中，酶解pH值为5.0-8.0。

所述酶解中，酶解温度控制为30℃-50℃。

所述酶解中，酶解时间控制为1h-24h。

本发明的有益技术效果：本发明方法制备了铁皮石斛低聚糖，该方法简单，可实施行强，制备得到的铁皮石斛低聚糖的DPPH清除率可达23.7％，总抗氧化活性可达0.65U/mL。