[发明专利]一种定向改造的氨基葡萄糖合酶突变体及其应用

权利要求书

1.一种定向改造的氨基葡萄糖合酶突变体，其特征在于，其氨基酸序列如序列表SEQ ID No.1所示。

2.权利要求1所述定向改造的氨基葡萄糖合酶突变体的基因，其特征在于，其核苷酸序列如序列表SEQ ID No.2所示。

3.包含权利要求2所述氨基葡萄糖合酶突变体基因的工程菌。

4.权利要求1所述定向改造的氨基葡萄糖合酶突变体在氨基葡萄糖生物合成中的应用，其特征在于，将突变体通过共表达氨基葡萄糖乙酰化酶，将发酵体系中的氨基葡萄糖转化为乙酰化氨基葡萄糖，从而减少产物的抑制效应，提升氨基葡萄糖产量。

5.一种通过基因工程手段定向改造氨基葡萄糖合酶的方法，其特征在于，包括克隆表达氨基葡萄糖合酶基因，并采用连续易错PCR，建立突变体文库进行高通量筛选，获得发酵性能提升的氨基葡萄糖合酶突变体M15-9。

6.根据权利要求5所述的通过基因工程手段定向改造氨基葡萄糖合酶的方法，其特征在于，所述定向改造的氨基葡萄糖合酶编码基因相对于天然酶60位的丙氨酸变为丝氨酸，128位的缬氨酸变为丙氨酸，352位的天冬氨酸变成了丙氨酸，354位的精氨酸变成半胱氨酸，422位的异亮氨酸变成蛋氨酸，432位的亮氨酸变成了缬氨酸，471位的天冬氨酸变成了谷氨酸，556位的亮氨酸变成了脯氨酸，567位的的缬氨酸变为谷氨酸。