[发明专利]一种载促骨合成药物纳米颗粒脂‑聚合物的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及医药领域，更具体的说是涉及一种载促骨合成药物纳米颗粒脂-聚合物的制备方法。

背景技术

骨质疏松症是一种渐进性的骨吸收和骨形成失衡的系统性骨疾病，骨质疏松症发生的细胞学基础是相对较弱的成骨细胞活性和/或较强的破骨细胞活性，导致了骨代谢失衡。目前的骨质疏松治疗药物可以分为两大类，抗骨吸收药物和促骨合成药物，抗骨吸收药物的主要作用机理是以破骨细胞为靶标，抑制病理性骨吸收。而促骨合成药物以成骨细胞为靶标，主要促进骨合成代谢和骨形成，使骨容量和骨密度增加。然而，大多数抗骨吸收药物有抑制骨质合成，促骨合成药有非特异性促进骨吸收的副作用。为了获得更好的疗效，一些学者也尝试联合应用抗骨吸收药和促骨合成药物，然而联合用药并不一定比单一药物具有更好的疗效，产生这种现象的原因是：不管是促骨合成药物还是抗骨质吸收药物，药物在骨组织内均是非特异性分布，药物可以同时作用于成骨细胞和破骨细胞，不可避免地带来副作用。目前的骨靶向药物传递系统仅仅能实现骨组织靶向，而不能实现药物在骨组织内精准的细胞靶向传递。

骨的吸收和重建是一个动态平衡的过程，骨改建过程发生于所有骨的BMU中，包括活化、骨吸收、反转和骨形成四个不同阶段并不断循环发生，从而在BMU中形成明显的骨吸收区和骨形成区。成骨细胞和破骨细胞在BMU中的空间分布明显不同。在骨吸收区，大量破骨细胞附着于成熟骨表面使骨溶解；在骨形成区，成骨细胞成为主导细胞并形成新骨。在骨吸收区均为成熟骨质，矿化程度高，羟基磷灰石结晶度高；而在骨形成区为新生骨质，矿化程度低，羟基磷灰石结晶度低。一些特殊多肽对不同结晶度羟基磷灰石显示出了选择性吸附特性，天冬氨酸、丝氨酸重复序列可特异性吸附在低结晶度羟基磷灰石表面；在体外天冬氨酸、丝氨酸重复序列也显示出良好地吸附至成骨细胞矿化结节和无定形磷酸钙的特性。促骨合成药物在天冬氨酸、丝氨酸重复序列引导下可以特异性作用于骨形成区集聚的成骨细胞。因此，天冬氨酸、丝氨酸重复序列可以作为特异性靶向分子，实现促骨合成药物的细胞靶向传递。

发明内容

针对现有技术存在的不足，本发明的目的在于提供一种载促骨合成药物纳米颗粒脂-聚合物的制备方法，使促骨合成药物在天冬氨酸、丝氨酸重复序列引导下可以特异性作用于骨形成区集聚的成骨细胞，可以大大减少促骨合成药物促进骨吸收的副作用。

为实现上述目的，本发明提供了如下技术方案：一种载促骨合成药物纳米颗粒脂-聚合物的制备方法，

步骤一、采用多肽固相合成法制备SDSSDC；

步骤二、在脂质体上外接SDSSDC，得到SDSSDC-脂质体；

步骤三、以促骨合成药物、聚乳酸-羟基乙酸共聚物PLGA、卵磷脂和SDSSDC-脂质体为原料制备载促骨合成药物纳米颗粒脂-聚合物。

作为本发明的进一步改进，所述脂质体为二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-马来酰亚胺共聚、二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-琥珀酰亚胺共聚、二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-硅烷共聚、二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-氨基共聚或二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇共聚的一种。

作为本发明的进一步改进，所述步骤二中合成SDSSDC-脂质体的具体步骤如下：

采用1-乙基-3-(3-二甲基氨丙基)-碳二亚胺和N-羟基琥珀酰亚胺作为偶联试剂活化SDSSDC羧基端3-4h，再加入脂质体，在室温下混合反应12-24h，透析，冻干，待用。

作为本发明的进一步改进，所述SDSSDC与脂质体的质量比为1：10-1:20。

作为本发明的进一步改进，所述步骤三的具体步骤如下：

a、将9-12mg卵磷脂、4-6mg SDSSDC-脂质体溶于15-25mL质量浓度3-6％的乙醇水溶液中得到A溶液；

b、将促骨合成药物加入到水或乙腈中混合均匀，然后倒入A溶液中并混合均匀得到B溶液，使促骨合成药物的浓度为200-400ug/ml；

c、将PLGA溶于质量分数为80％的乙腈水溶液中得到浓度为2mg/mL的C溶液，将20-30mL C溶液加入B溶液中混合均匀得到D溶液；

d、将D溶液用超声破碎仪超声5-10min，期间逐滴加完毕5-15mL C溶液；

e、收集步骤d得到的超声后的混合液于10kDa的超滤管内离心超滤三次，即得载促骨合成药物纳米颗粒脂-聚合物。