[发明专利]一种含非变性II型胶原蛋白的软骨提取物的制备方法

权利要求书

1.一种含非变性II型胶原蛋白的软骨提取物的制备方法，其特征在于，该方法依次包括以下步骤：脱脂、消毒、匀浆、酶解、过滤、干燥；其中，在所述酶解步骤中：将在匀浆步骤中获得的浆状物的pH调节为2.5～8.5，加入软骨重量的0.001％-2％的酶，加入软骨重量的1/20～1/500的木瓜和/或菠萝低温榨汁后过滤获得的清液，酶解12～48h，酶解温度为25-50℃；所述酶优选为胃蛋白酶、枯草杆菌蛋白酶、碱性蛋白酶、金属蛋白酶中的一种或几种。

2.根据权利要求1所述的一种含非变性II型胶原蛋白的软骨提取物的制备方法，其特征在于，所述酶的用量为软骨重量的0.5-2％，木瓜和/或菠萝低温榨汁后过滤获得的清液的用量为软骨重量的1/20-1/50，酶解时间为12～20h，酶解温度25～40℃。

3.根据权利要求1所述的一种含非变性II型胶原蛋白的软骨提取物的制备方法，其特征在于，加入的清液是木瓜和菠萝低温榨汁后过滤获得的混合清液，其中，木瓜和菠萝的重量比为1-10：1，优选为3-6：1。

4.根据权利要求1-3任意一项所述的一种含非变性II型胶原蛋白的软骨提取物的制备方法，其特征在于，在干燥步骤后进行粉碎，其中，

脱脂：用一定浓度的脱脂剂浸泡软骨丁状物0.2h～6h，然后用水清洗至清洗后的水的pH到5.5～8.5；

消毒：用一定浓度消毒液浸泡脱脂后的软骨丁状物1～3次，然后用水清洗至软骨丁状物无味；

匀浆：将消毒后的软骨丁状物进行匀浆处理，匀浆后软骨的粒度为50～300目；

过滤：利用5～100目筛网进行过滤，去除溶液中大颗粒物质，收集过滤液；

干燥：将过滤收集的过滤液进行低温干燥，干燥温度不高于30℃，干燥后获得软骨提取物；

粉碎：干燥后的软骨提取物在4℃以下进行超微粉碎，粉碎物的目数控制在100-500目。

5.根据权利要求4所述的一种含非变性II型胶原蛋白的软骨提取物的制备方法，其特征在于，所述脱脂剂是一定浓度的NaOH溶液、KOH溶液、Na₂CO₃溶液、NaCl溶液、KCl溶液中的一种或几种。

6.根据权利要求5所述的一种含非变性II型胶原蛋白的软骨提取物的制备方法，其特征在于，所述脱脂剂的浓度为0.01～3重量％，所述脱脂剂与软骨的重量比为1～10:1。

7.根据权利要求4所述的一种含非变性II型胶原蛋白的软骨提取物的制备方法，其特征在于，消毒步骤中所使用的消毒液是次氯酸钠和/或双氧水，消毒过程中消毒液的浓度控制在100ppm～2000ppm，消毒时间控制在0.2h～12h。

8.根据权利要求4所述的一种含非变性II型胶原蛋白的软骨提取物的制备方法，其特征在于，匀浆步骤在37℃以下进行。

9.根据权利要求4所述的一种含非变性II型胶原蛋白的软骨提取物的制备方法，其特征在于，低温干燥方法是滚筒烘干法、低温长网烘干法、冷冻干燥法。

10.根据权利要求9所述的一种含非变性II型胶原蛋白的软骨提取物的制备方法，其特征在于，在有预冷的步骤时，预冷温度不高于-10℃，干燥后软骨提取物的含水量控制在6％以下。