[发明专利]抗IL-1β单克隆抗体及其应用

说明书

本发明抗体药物技术领域，公开了利用噬菌体抗体库技术筛选并利用基因工程方法制备的全人源抗人IL‑1β单克隆抗体，并公开了编码该单克隆抗体的DNA分子、包含编码该单克隆抗体的DNA分子表达载体、宿主细胞及用途。本发明所述抗IL‑1β单克隆抗体能够阻断人IL‑1β与人IL‑1R的结合；进一步通过结合IL‑1β，阻断IL‑1β和其受体信号通路的可以降低非必要的IL‑lβ最初因诱导发热、扩增淋巴细胞相应和刺激急性期应答。本发明所述抗IL‑1β单克隆抗体可用于检测IL‑1β表达，同时用于冷吡啉相关周期性综合征的预防和治疗。

技术领域

本发明涉及抗体药物技术领域，尤其涉及全人源抗IL-1β单克隆抗体及其应用。

背景技术

白细胞介素1β(IL-1β)是一种主要由单核巨噬细胞产生的重要细胞因子和多肽调节因子，在细胞免疫激活中发挥调节作用。IL-1β，含153个氨基酸，其理论分子量为17.5KD。IL-1β，不含有二硫键，但两个半胱氨酸(Cys)残基是IL-1β活性所必需的。

IL-1β具有很强的生物学活性，包括：(1)介导炎症反应：IL-1β不仅本身能够引起炎症反应，而且可以诱导环氧化酶2(cyclooxygenase-2，COX-2)、iNOS、IL-6等其他炎症因子的表达，从而进一步激活基质细胞和免疫细胞产生更多的IL-1β参与炎症反应；(2)免疫调节作用，协同刺激T细胞，诱导许多细胞产生其他淋巴因子；(3)参与恶液质的形成，有致负氮平衡的效应，可以刺激骨骼肌分解蛋白质；(4)诱导急性时相蛋白参与急性期反应；(5)诱导成纤维细胞增殖等。

IL-1β可以和效应细胞上的IL-1RA受体结合，并且快速引起下游信号传导，在不同细胞类型，如：单核细胞，巨噬细胞，上皮细胞，血管内皮细胞，软骨细胞，成纤维细胞中多达数百个基因的表达，诱导机体的炎症反应。研究认为，IL-1β为机体中一种促炎因子，它的产生给机体带来的弊大于利，IL-1β非正常表达也是一些疾病的典型特征，其异常表达可能导致机体正常组织病变及破坏。

人体正常的免疫系统处于平衡状态，在此平衡状态中，促炎性和抗炎性的细胞及分子被调节来促使机体在不破坏自身组织的条件下进行正常的免疫防御。一旦这种调节的平衡被打破，非特异性刺激和活化可导致大量有效的破坏性免疫分子和炎症分子生成和释放。过量产生促炎细胞因子或在错误的生物学背景下细胞因子的产生与大量疾病的发病率和死亡率密切相关。

IL-lβ参与多种生物途径，是种有效分子，能够通过触发细胞少至一或两个受体来起作用。IL-lβ作为一种信号分子，能够在非常低的浓度，甚至微摩尔级别下起作用。IL-lβ最初因诱导发热、扩增淋巴细胞相应和刺激急性期应答被人们所认知。IL-lβ在感染时能够诱导炎症反应。IL-1β为一种致炎细胞因子，广泛参与了人体组织破坏、水肿形成等多种病理损伤过程。它可促进β防御素-4的生成，但总体上，破坏大于防御。如青少年全身特发性关节炎(sJIA)是由白介素-1β介导的自身炎症性疾病。

卡那单抗(canakinumab)是一可快速和选择性阻滞IL-1β的全人单抗，2009年6月经FDA批准上市，用于治疗儿童和成人冷吡啉相关周期性综合征(cryopyrin-associatedperiodic syndrome,CAPS)，包括并限于家族性寒冷型自身炎症性综合征(famil-ial coldauto-inflammatory syndrome,FCAS)与穆-韦综合征(Muckle-Wells syndrome,MWS)。卡那单抗与秋水仙碱相比减少了48％-75％的痛风发作，与曲安奈德相比其可有效地缓解疼痛，痛风发作率下降94％，但此药有较高的不良反应发生率。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供全人源抗IL-1β单克隆抗体、编码该单克隆抗体的核苷酸分子、载体、宿主细胞及其用途。由本发明涉及的抗体基因可变区的序列，可构建全长抗体分子作为药物用于临床上由于IL-1β异常表达所导致的适应症的使用。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：