[发明专利]EB病毒感染淋巴细胞亚群的鉴定方法及其应用

权利要求书

1.一种用于指导制备治疗EB病毒感染疾病的药物的EB病毒感染淋巴细胞亚群的鉴定方法，其特征在于，所述鉴定方法包括以下步骤：

步骤(a)，提取人外周血单个核细胞；

步骤(b)，对所述人外周血单个核细胞进行分选，分别得到不同亚群分型的淋巴细胞；

步骤(c)，用流式细胞仪验证分选得到的所述不同亚群分型的淋巴细胞的纯度；

步骤(d)，分别提取所述不同亚群分型的淋巴细胞的DNA，并应用实时荧光定量PCR技术测定所述不同亚群分型的淋巴细胞中EB病毒DNA的含量；

其中，步骤(b)中，所述不同亚群分型的淋巴细胞包括：CD3⁺T淋巴细胞、CD4⁺T淋巴细胞、CD8⁺T淋巴细胞、CD19⁺B淋巴细胞以及CD56⁺NK细胞；

所述分选包括基于磁珠的分选；和/或，所述分选包括基于流式细胞仪的分选；

所述基于磁珠的分选包括：将所述外周血单个核细胞按照1:1:1:2:2的比例分为五份，分别加入能够与CD3⁺T淋巴细胞、能够与CD4⁺T淋巴细胞、能够与CD8⁺T淋巴细胞、能够与CD19⁺B淋巴细胞以及能够与CD56⁺NK细胞特异性结合的磁珠，然后分别利用磁力架进行分选。

2.根据权利要求1所述的鉴定方法，其特征在于，所述基于流式细胞仪的分选包括：在所述外周血单个核细胞中加入抗CD3抗体、抗CD4抗体、抗CD8抗体、抗CD19抗体以及抗CD56抗体，孵育后过流式细胞仪进行分选。

3.根据权利要求2所述的鉴定方法，其特征在于，步骤(c)中，所述纯度合格的标准为90％以上。

4.权利要求1-3任一项所述的鉴定方法在确定EB病毒感染疾病的治疗靶点中的应用。

5.权利要求1-3任一项所述的鉴定方法在指导制备治疗EB病毒感染疾病的药物中的应用。