[发明专利]李斯特菌疫苗载体用于在寄生虫感染的个体中扭转免疫无应答的用途

说明书

本申请为申请日为2011年10月3日、申请号为201180057899.5、发明名称为“李斯特菌疫苗载体用于在寄生虫感染的个体中扭转免疫无应答的用途”的发明专利申请的分案申请。

相关申请的交叉引用

此申请要求提交于2010年10月1日的美国临时申请号61/388,822和提交于2010年11月3日的美国临时申请号61/409,730的优先权。这些申请通过引用以其整体并入本文。

发明领域

本发明涉及在由于持续的寄生虫感染而具有持续的Th2免疫应答谱的对象中使用李斯特菌(Listeria)疫苗载体诱导Th1免疫应答。

发明背景

在全世界许多人口中，疟疾、TB和HIV-1仍是巨大的疾病负担。尽管经过数十年的努力，仍然没有用于疟疾或HIV-1的疫苗。撒哈拉以南的人口将是从疟疾、TB和HIV-1疫苗中最受益的。在撒哈拉以南的国家中，大多数个体都感染有一或多种寄生虫(在非洲的许多地区超90％的流行度)，其压制免疫应答、令人或动物宿主的免疫系统倾向于(skew)T-辅助2型(Th2)，并且压制疫苗特异性应答。因此，寄生虫感染的人群存在对疫苗不产生所需免疫应答的潜在可能，所述疫苗设计为驱动Th1型和细胞毒性T细胞应答。之前的工作已显示，除非在疫苗接种前消除寄生虫感染，用于HIV-1的裸露DNA疫苗不能产生抗原特异性T细胞介导的免疫应答(Da'dara等人，Vaccine.2010Feb 3；28(5):1310-7.Epub 2009Nov 24，通过引用以其整体并入本文)。

HIV和其它流行性传染疾病的疫苗开发对发展中国家显然是重要的，所述疫苗开发是为了找到将在寄生虫感染的受体中驱动显著的疫苗特异性Th1免疫应答的疫苗。

发明概述

一方面，本发明涉及在具有持续Th2表型谱的对象中诱导Th1免疫应答的方法，所述方法包括向所述对象施用治疗有效剂量的李斯特菌疫苗载体的步骤。

另一方面，本发明涉及在具有持续Th2表型谱的对象中诱导针对传染病的Th1免疫应答的方法，所述方法包括向所述对象施用治疗有效剂量的李斯特菌疫苗载体的步骤，其中李斯特菌疫苗载体表达并分泌与另外的免疫原性多肽融合的传染病抗原，从而在所述对象中诱导Th1免疫应答。

一方面，本发明涉及治疗具有持续Th2表型谱的对象中的传染病的方法，所述方法包括向所述对象施用治疗有效剂量的李斯特菌疫苗载体的步骤，其中所述李斯特菌疫苗载体表达并分泌与另外的免疫原性多肽融合的传染病抗原，从而在所述对象中治疗所述传染疾病。

另一方面，本发明涉及治疗具有持续Th2表型谱的对象中的癌症的方法，所述方法包括向所述对象施用包含重组李斯特菌菌株的疫苗的步骤，其中所述疫苗将Th2表型转变为Th1表型，其允许细胞介导的抗癌应答发生。

附图简述

说明书中特别指出并明确地主张了本发明所考虑的主题。然而，在阅读所附附图时通过参考下列详细描述可最好地理解本发明：

图1显示了实验概要，其中令6-8周龄雌性Balb/c小鼠保持天然(naive)或通过腹腔注射50尾蚴(cercariae)曼氏血吸虫(Schistosoma mansoni)感染。在10周时通过ELISA检测抗血吸虫可溶性卵抗原(SEA)的循环抗体证实感染。感染后12周，小鼠通过腹腔注射0.2(或0.1)LD50的李斯特菌-载体HIV-1疫苗(Lm-gag)或李斯特菌-载体HPV疫苗(Lm-E7)对照初免(prime)或保持未疫苗接种。初免后2周以相同的方式加强疫苗接种小鼠。如所示地，最终疫苗接种(wplv)后的2周或更多周评估疫苗反应。

图2显示了血吸虫感染并疫苗接种的小鼠中宿主Th2偏好性的验证。蠕虫感染的、李斯特菌HIV-1疫苗接种的小鼠为Th2偏好的并且为免疫压制的，如由IFN-γ产物降低以及IL-4和IL-10水平升高所表明的那样。感染后10-12周，疫苗接种小鼠。在最终疫苗接种后2周，收集脾细胞并按每孔1.5x 10⁶个细胞将其放置于含培养基、SEA或伴刀豆球蛋白A(作为阳性对照)的48孔平板中。孵育72小时后，收集上清并通过ELISA(BD)分析IFN-g(A)、IL-4(B)和IL-10(C)的水平。显示了来自2次重复实验的合并数据。

图3显示了在曼氏血吸虫感染的小鼠中IFN-γ产物减少。

图4显示了在慢性血吸虫病小鼠中IL-4水平增加。

图5显示了在曼氏血吸虫感染的小鼠中IL-10产物增加。