[发明专利]羊肚菌抗白霉病性能的鉴定方法有效
申请号: | 201710269190.0 | 申请日: | 2017-04-24 |
公开(公告)号: | CN107043804B | 公开(公告)日: | 2020-05-19 |
发明(设计)人: | 陈诚;卢代华;张鸿;王剑;伏荣桃;龚学书;罗曦;李星月 | 申请(专利权)人: | 四川省农业科学院植物保护研究所 |
主分类号: | C12Q1/18 | 分类号: | C12Q1/18 |
代理公司: | 成都立信专利事务所有限公司 51100 | 代理人: | 冯忠亮 |
地址: | 610016 *** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 羊肚菌抗白霉病 性能 鉴定 方法 | ||
1.羊肚菌抗白霉病性能的鉴定方法,其特征在于步骤如下:
(1)接种器皿准备:将玻璃平皿、滤纸片、蒸馏水和镊子进行121℃,30min高压蒸汽灭菌,用细铁丝将无菌透气封口膜固定成下端开口的圆柱体模型,灭菌备用;
(2) 接种病原菌的准备:接种白霉病病原菌Paecilomyces penicillatus收集于四川省农业科学院土壤肥料研究所,将白霉病病原菌活化转接到PDA培养基上,PDA培养基组成:土豆200g,葡萄糖20g,琼脂18g,蒸馏水1000ml,在28℃培养箱中培养5d,将菌落作为接种材料;
(3) 羊肚菌子实体准备:将步骤(1)中若干无菌封口膜模型盖在刚形成的至少两种羊肚菌子实体上,两天后,带上无菌手套,采集健康的至少两品种羊肚菌:揭开无菌封口膜模型,将每种羊肚菌子实体连土部分拔起,用干净的毛刷去除菌柄底部的土壤,将采集的每种羊肚菌子实体用干净的器皿带回室内备用;
(4) 白霉病病原菌接种:将步骤(1)处理后的灭菌滤纸片置于培养皿底部,随后倒入适量的灭菌蒸馏水,待滤纸片浸湿后,将多余的水分倒出,用无菌镊子将步骤(3)中处理好的每种羊肚菌子实体分别夹入不同的培养皿,用无菌镊子取1mm2步骤(2)处理后的病原菌菌落接种于羊肚菌子实体菌盖中部,盖好培养皿盖,以接种1mm2无菌PDA培养基做对照;
(5) 接种后处置:将步骤(4)处理过后的培养皿置于具有100-300 lux散射光的室内培养,室内温度设为18-22℃,接种96h后,用叶面积仪测定每种羊肚菌子实体菌盖及病斑的面积,根据计算白霉病病斑占羊肚菌菌盖的比例大小,从而衡量各种羊肚菌品种抗白霉病性能的好坏。
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