[发明专利]甲砜霉素四氟丙酸酯及其制备方法和应用

说明书

本发明涉及一种甲砜霉素四氟丙酸酯及其制备方法和应用，明确了甲砜霉素四氟丙酸酯为氟苯尼考所含未知杂质，其制备方法为：将(4R,5R)‑2‑二氯甲基‑4,5‑二氢‑5‑(4‑甲砜基苯基)‑4‑噁唑甲醇与N,N‑二乙基‑1,1,2,3,3,3‑六氟丙胺进行反应得[(4R,5R)‑2‑二氯甲基‑4,5‑二氢‑5‑(4‑甲砜基苯基)噁唑‑4‑基]甲醇‑2,3,3,3‑四氟丙酸酯后，经水解开环而得，合成的产物与分离所得杂质具有相同的质谱和¹H‑NMR谱。本发明设计的甲砜霉素四氟丙酸酯合成工艺具有原料易得、反应条件温和、反应过程容易控制等优点，为氟苯尼考质量控制提供了符合要求的对照品，可以大大提高用药安全性。

技术领域

本发明属于医药及药物分析技术领域，具体地说是涉及一种氟苯尼考中的未知杂质甲砜霉素四氟丙酸酯及其制备方法和应用。

背景技术

氟苯尼考具有广谱抗菌活性，可用于治疗动物的革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌和立克次体等引起的感染，且对甲砜霉素、氯霉素的耐药性细菌具有较强抑制作用，在体内残留较低，现已被广泛使用。其主要生产工艺流程如下：

即甲砜胺(I)与二氯乙腈进行成环缩合得到环合物(II)，用N,N-二乙基-1,1,2,3,3,3-六氟丙胺对环合物(II)进行氟化得到氟化物(III)，氟化物(III)水解得产物氟苯尼考。

按照《中华人民共和国兽药典》(2010年版)采用HPLC法分析氟苯尼考有关物质时，色谱记录时间为主峰保留时间的2.5倍，而《中华人民共和国兽药典》(2015年版)则将色谱记录时间延长至主峰保留时间的5倍，保持其它条件与2010年版兽药典相同。色谱记录时间延长后，在相对保留时间RRT3.1处出现一较大未知杂质，按照2010年版兽药典检测则无法检出该杂质。

氟苯尼考应用范围广泛，且用量大，因此对其所含杂质进行详细研究并加以控制，将大大提高用药安全性。对于采用2015年版中国兽药典分析氟苯尼考新出现的相对保留时间RRT3.1未知杂质，各国兽药典以及文献、专利等均无该杂质的结构及制备等相关信息。

发明内容

为了更好地控制氟苯尼考的质量，本发明通过对氟苯尼考中的未知杂质进行了分离、结构确证，提供了一种甲砜霉素四氟丙酸酯及其制备方法和应用。

本发明采用如下技术方案：

结构式如(IV)所示的甲砜霉素四氟丙酸酯：

上述结构式如(IV)所示的甲砜霉素四氟丙酸酯的结构通过下述方法判定得到：

取含有相对保留时间RRT3.1未知杂质的氟苯尼考样品粉末与硅胶混合均匀，以石油醚-乙酸乙酯-氨水为淋洗剂，用硅胶层析柱过柱分离，收集含有目标未知杂质的洗脱液。

用2015版中国兽药典中HPLC法检测上述洗脱液，其出峰时间与检测氟苯尼考样品时未知杂质的出峰时间吻合，说明收集的洗脱液所含物质为目标杂质。

经多次过柱富集，合并含目标杂质的洗脱液，减压浓缩去除溶剂，剩余物料减压干燥，得类白色固体。

将所得固体用甲醇溶解，利用Esquire-LC型电喷雾离子阱质谱仪进行质谱分析。在正离子模式下通常可检测到[M+H]⁺、[M+Na]⁺、[M+K]⁺等离子峰，样品在正离子模式下检测到的m/z＝483.9、506.2、522.1等离子峰符合该规律，说明该杂质的分子质量为483。

将样品溶于DMSO-d₆，然后进行¹H-NMR、¹³C-NMR、DEPT-135°、碳氢相关(HMQC)和氢氢相关(H-H Cosy)分析。