[发明专利]真菌DNA提取液及提取方法

权利要求书

1.一种真菌DNA提取液，其特征在于，包括质量百分含量为4％-6％的Chelex-100、8mM-12mM的pH为8.0-8.7的tris-HCl、0.08mM-0.12mM的EDTA-Na₂、质量百分含量为0.08％-0.12％的NaN₃、200μg/ml-250μg/ml的蛋白酶K以及13mg/ml-15mg/ml的蜗牛酶。

2.如权利要求1所述的真菌DNA提取液，其特征在于，所述Chelex-100的质量百分含量为5％；所述tris-HCl的浓度为10mM，pH为8.3，所述EDTA-Na₂的浓度为0.1mM；所述NaN₃的浓度为0.1％；所述蛋白酶K的浓度为200μg/ml；所述蜗牛酶的浓度为13mg/ml。

3.一种真菌DNA提取方法，其特征在于，使用如权利要求1或2所述的真菌DNA提取液进行提取。

4.如权利要求3所述的真菌DNA提取方法，其特征在于，在提取过程中，按照每50μl的真菌DNA提取液加入45mg-55mg的真菌菌体的比例将待提取DNA的真菌菌体加入至所述真菌DNA提取液中，得到混合液。

5.如权利要求4所述的真菌DNA提取方法，其特征在于，在提取过程中，将真菌菌体与真菌DNA提取液的混合液置于55℃-58℃下保温以裂解细胞壁，释放出DNA，之后再置于95℃-100℃下保温使蛋白质变性，同时chelex-100吸附各种杂质以对DNA进行纯化，最后离心收集上清液。

6.如权利要求5所述的真菌DNA提取方法，其特征在于，在55℃-58℃下保温时间为1h-2h；在95℃-100℃下保温时间为10min-15min。

7.如权利要求6所述的真菌DNA提取方法，其特征在于，在提取过程中，按照每50μl的真菌DNA提取液加入50mg的真菌菌体的比例将待提取DNA的真菌菌体加入至所述真菌DNA提取液中；

在提取过程中，将真菌菌体与真菌DNA提取液的混合液先置于56℃下保温1小时，再置于100℃下保温10分钟，最后离心收集上清液。

8.如权利要求7所述的真菌DNA提取方法，其特征在于，所述离心的转速为13000rpm，时间为10分钟。

9.如权利要求3-8中任一项所述的真菌DNA提取方法，其特征在于，在将待提取DNA的真菌菌体加入至真菌DNA提取液之前，还包括破碎所述真菌菌体的细胞壁的步骤。

10.如权利要求9所述的真菌DNA提取方法，其特征在于，所述破碎所述真菌菌体的细胞壁是使用液氮研磨的方法。