[发明专利]鉴别口蹄疫病毒和水泡性口炎病毒的二重荧光RT‑LAMP检测引物组、试剂盒及其应用在审
| 申请号： | 201710262138.2 | 申请日： | 2017-04-20 |
| 公开（公告）号： | CN106893787A | 公开（公告）日： | 2017-06-27 |
| 发明（设计）人： | 谢芝勋;范晴;谢志勤;谢丽基;黄莉;黄娇玲;张艳芳;曾婷婷;王盛;罗思思;邓显文;刘加波;庞耀珊 | 申请（专利权）人： | 广西壮族自治区兽医研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/68;C12N15/11 |
| 代理公司： | 北京中誉威圣知识产权代理有限公司11279 | 代理人： | 朱志宽 |
| 地址： | 530001 广西壮族*** | 国省代码： | 广西;45 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 鉴别 口蹄疫病毒 水泡 口炎 病毒 二重 荧光 rt lamp 检测 引物 试剂盒 及其 应用 | ||
1.一种鉴别口蹄疫病毒和水泡性口炎病毒的二重荧光RT-LAMP检测引物组，其特征在于，包括2组特异性引物，其中1组为FMDV-F3、FMDV-B3、FMDV-FIP(F1c-F2)和FMDV-BIP(B1c-B2)，另1组为VSV-F3、VSV-B3、VSV-FIP(F1c-F2)和VSV-BIP(B1c-B2)，其分别具有如SEQ ID No.1至SEQ ID No.8所示的序列。
2.根据权利要求1所述的鉴别口蹄疫病毒和水泡性口炎病毒的二重荧光RT-LAMP检测引物组，其特征在于，所述的引物FMDV-FIP(F1c-F2)的5’端标记FITC荧光基团，该基团在520nm波长下呈黄绿色；所述的引物VSV-FIP(F1c-F2)的5’端标记CY5.5荧光基团，该基团在670nm波长下呈大红色。
3.一种鉴别口蹄疫病毒和水泡性口炎病毒的二重荧光RT-LAMP检测试剂盒，其特征在于，其反应体系为25μL：1μL RNA模板，10×buffer 2.5μL(成分为200Mm Tris–HCl(pH 8.8)，100mM KCl，80mM MgSO4，100mM(NH4)2SO4，1％Tween 20，8M betaine，and 14m dNTPs，15U of Bst DNA聚合酶，20U AMV逆转录酶，内引物各40pmol，外引物各5pmol。
4.根据权利要求3所述的鉴别口蹄疫病毒和水泡性口炎病毒的二重荧光RT-LAMP检测试剂盒，其特征在于，所述的内引物为FMDV-FIP，FMDV-BIP，VSV-FIP和VSV-BIP，其分别具有如SEQ ID No.3、SEQ ID No.4、SEQ ID No.7和SEQ ID No.8所示的序列；所述的外引物为FMDV-F3，FMDV-B3，VSV-B3和VSV-F3，其分别具有如SEQ ID No.1、SEQ ID No.2、SEQ ID No.5和SEQ ID No.6所示的序列。
5.根据权利要求1或2所述的用于鉴别口蹄疫病毒和水泡性口炎病毒的二重荧光RT-LAMP检测引物组、权利要求3或4所述的鉴别口蹄疫病毒和水泡性口炎病毒的二重荧光RT-LAMP检测试剂盒在鉴别口蹄疫病毒和水泡性口炎病毒中的应用。
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