[发明专利]拮抗抑制人PD-1抗原与其配体结合的单克隆抗体及其制备方法与应用

权利要求书

1.一种拮抗抑制人PD-1抗原与其配体结合的单克隆抗体或其衍生体，其特征在于，其包含第一可变区和第二可变区，其中所述第一可变区是抗体轻链可变区，其抗原互补决定区CDR1，CDR2和CDR3分别为SEQ ID NO：3，SEQ ID NO：4 及SEQ ID NO：5所示的氨基酸序列；其中所述第二可变区是抗体重链可变区，其抗原互补决定区CDR1，CDR2和CDR3分别为SEQID NO：8，SEQ ID NO：9 及SEQ ID NO：10所示的氨基酸序列。

2.根据权利要求1所述的抗体或其衍生体，其特征在于，所述第一可变区是抗体轻链可变区，为SEQ ID NO：11所示的氨基酸序列；其所述第二可变区是抗体重链可变区，为SEQ IDNO：12所示的氨基酸序列。

3.根据权利要求1或2所述的抗体或其衍生体，其特征在于，其包含所述抗体轻链可变区和人抗体轻链恒定区，及包含所述抗体重链可变区和人抗体重链恒定区的铰链区，CH1区，CH 2区和CH3区。

4.根据权利要求3所述的抗体或其衍生体，其特征在于，所述人抗体轻链恒定区来自人抗体kappa链或抗体lamda链，所述人抗体重链恒定区来自人IgG1，IgG2，IgG3或IgG4亚型。

5. 一种编码权利要求2所述抗体或其衍生体的DNA分子或基因，其特征在于，编码抗体轻链可变区的核苷酸序列如SEQ ID NO：13所示，编码抗体重链可变区的核苷酸序列如SEQID NO：14所示。

6.一种表达载体，其特征在于，它含有权利要求5所述的DNA分子或基因以及与该DNA分子或基因操作性相连的表达调控序列。

7.一种重组宿主细胞，其特征在于，它由权利要求6所述的表达载体转化而成。

8.根据权利要求7所述的重组宿主细胞，其中所述重组宿主细胞表达权利要求2所述的抗体或其衍生体。

9.一种药物或药物组合物，其特征在于，它含有药学上有效量的如权利要求1或2所述的抗体或其衍生体，以及药学上可接受的载体。

10.根据权利要求1所述的单克隆抗体或其衍生体在制备治疗肿瘤的药物中的应用。

11.根据权利要求10所述的应用，其特征在于，所述肿瘤为结肠癌。

12.一种制备权利要求1所述的抗体或其衍生体的方法，其特征在于，该方法包括如下步骤：

a)提供一表达载体，该表达载体含有权利要求5所述的DNA分子或基因以及与该DNA分子或基因操作性相连的表达调控序列；

b)用步骤a）所述的表达载体转化宿主细胞；

c)在适合所述抗体表达的条件下培养步骤b)所得的宿主细胞：和

d)采用亲合层析从宿主细胞培养液中分离纯化获得所述抗体。