[发明专利]重组口蹄疫二价灭活疫苗及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种二价口蹄疫病毒疫苗组合物，其特征在于，所述疫苗组合物包含第一口蹄疫病毒疫苗和第二口蹄疫病毒疫苗，所述第一口蹄疫病毒疫苗包含含有第一口蹄疫重组核酸或由第一口蹄疫重组核酸编码的第一口蹄疫病毒，所述第一口蹄疫重组核酸的序列包含O/CHA/99株的口蹄疫病毒株的核酸序列，但是所述O/CHA/99株的口蹄疫病毒株的L基因中与P1基因相连接的177个连续的核苷酸序列、全部P1基因、以及P2基因中与P1基因相连接的1206个连续的核苷酸序列被O/JSCZ/2013株的核酸序列中如SEQ ID NO:1所示的序列替换，所述第二口蹄疫病毒疫苗为A型口蹄疫病毒重组疫苗株，所述A型口蹄疫病毒重组疫苗株包含如SEQ ID NO:4所示的核酸序列。

2.如权利要求1所述的疫苗组合物，其特征在于，所述第一口蹄疫病毒疫苗能够激发对O型口蹄疫病毒株的免疫活性。

3.如权利要求2所述的疫苗组合物，其特征在于，所述O型口蹄疫病毒株为Mya-98、PanAsia或Cathay谱系毒株。

4.如权利要求3所述的疫苗组合物，其特征在于，所述O型口蹄疫病毒株为O/BY/CHA/2010、O/0834或O/0718，并且所述第一口蹄疫病毒疫苗对O/BY/CHA/2010、O/0834或O/0718的PD₅₀值均大于6。

5.如权利要求1-4中任一项所述的疫苗组合物，其特征在于，所述第二口蹄疫病毒疫苗能够激发对A型口蹄疫病毒株的免疫活性。

6.如权利要求5所述的疫苗组合物，其特征在于，所述A型口蹄疫病毒株为SEA-97G1或SEA-97G2毒株。

7.如权利要求6所述的疫苗组合物，其特征在于，所述A型口蹄疫病毒株为A/WH/CHA/09或A/GDMM/2013，并且所述第二口蹄疫病毒疫苗对A/WH/CHA/09和A/GDMM/2013的PD₅₀值均大于6。

8.如权利要求1-7中任一项所述的疫苗组合物，其特征在于，所述第一口蹄疫病毒疫苗和所述第二口蹄疫病毒疫苗之间无免疫抑制。

9.如权利要求1-8中任一项所述的疫苗组合物，其特征在于，所述疫苗组合物能够激发对O型口蹄疫病毒株的免疫活性。

10.如权利要求9所述的疫苗组合物，其特征在于，所述O型口蹄疫病毒株为Mya-98、PanAsia或Cathay谱系的流行毒株。

11.如权利要求10所述的疫苗组合物，其特征在于，所述O型口蹄疫病毒株为O/BY/CHA/2010、O/0834或O/0718，并且所述疫苗组合物对O/BY/CHA/2010、O/0834或O/0718的PD₅₀值均大于6。

12.如权利要求1-11中任一项所述的疫苗组合物，其特征在于，所述疫苗组合物能够激发对A型口蹄疫病毒株的免疫活性。

13.如权利要求12所述的疫苗组合物，其特征在于，所述A型口蹄疫病毒株为SEA-97G1或SEA-97G2毒株。

14.如权利要求13所述的疫苗组合物，其特征在于，所述A型口蹄疫病毒株为A/WH/CHA/09或A/GDMM/2013，并且所述疫苗组合物对A/WH/CHA/09和A/GDMM/2013的PD₅₀值均大于6。

15.一种制备如权利要求1-14中任一项所述的疫苗组合物的方法，其特征在于，包含如下步骤：

(a)、培养第一口蹄疫病毒疫苗株并采集；

(b)、培养第二口蹄疫病毒疫苗株并采集；

(c)、将步骤(a)中采集的第一口蹄疫病毒疫苗株和步骤(b)中采集的第二口蹄疫病毒疫苗株灭活后进行混合。

16.如权利要求15所述的方法，其特征在于，在步骤(c)的所述混合之后再对口蹄疫病毒疫苗株进行乳化。

17.如权利要求16所述的方法，其特征在于，所述乳化是与ISA206佐剂以体积比1:1进行。

18.如权利要求15-17中任一项所述的方法，其特征在于，所述第一口蹄疫病毒疫苗株和所述第二口蹄疫病毒疫苗株适于悬浮细胞培养。