[发明专利]一种适配体过氧化物模拟酶可视化检测沙门氏菌的方法有效
| 申请号： | 201710253103.2 | 申请日： | 2017-04-18 |
| 公开（公告）号： | CN107084976B | 公开（公告）日： | 2019-07-30 |
| 发明（设计）人： | 吴世嘉;段诺;王周平;刘丽红 | 申请（专利权）人： | 江南大学;江苏大学 |
| 主分类号： | G01N21/78 | 分类号： | G01N21/78;G01N21/65;G01N33/531;G01N33/569 |
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| 地址： | 214122 江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 基于 适配体 识别 过氧化物 模拟 可视化 检测 沙门氏菌 方法 | ||
1.一种适配体过氧化物模拟酶可视化检测沙门氏菌的方法，其特征在于：通过以固定于微孔板的适配体1为捕获探针，以适配体2修饰的铁酸锌/还原氧化石墨烯为过氧化物模拟酶，当体系中存在沙门氏菌时，适配体与沙门氏菌发生特异性结合从而形成适配体1-沙门氏菌-适配体2/铁酸锌/还原氧化石墨烯的三明治夹心结构，加入显色底物TMB-H2O2，铁酸锌/还原氧化石墨烯复合纳米材料可以作为过氧化物模拟酶，催化H2O2氧化TMB发生显色反应，在一定浓度范围内，沙门氏菌的数量与相对吸光值呈正相关，从而实现对沙门氏菌的检测。
2.如权利要求1所述的一种适配体过氧化物模拟酶可视化检测沙门氏菌的方法，其特征在制备铁酸锌/还原氧化石墨烯作为过氧化物模拟酶，催化底物TMB-H2O2显色，铁酸锌/还原氧化石墨烯制备方法为：称取20mg氧化石墨烯溶于60mL乙醇中并超声分散2h，同时称取149mg Zn(NO3)2·6H2O和404mg Fe(NO3)3·9H2O溶解于20mL无水乙醇中，室温下磁力搅拌30min；逐滴向氧化石墨稀分散液中滴入Zn(NO3)2·6H2O和Fe(NO3)3·9H2O的乙醇溶液，继续搅拌30min；用6M的NaOH水溶液调节混合溶液pH至10，继续搅拌30min；将混合液转入100mL高压反应釜中180℃反应12h，冷却至室温后，弃去上清液，所得黑色固体产物用去离子水洗5次，得到铁酸锌/还原氧化石墨烯复合纳米材料，于50℃烘箱中干燥备用。
3.如权利要求1所述的一种适配体过氧化物模拟酶可视化检测沙门氏菌的方法，其特征在于：生物素化修饰的沙门氏菌适配体1序列为5’-biotin-AGTAATGCCCGGTAGTTATTCAAAGATGAGTAGGAAAAGA-3’，沙门氏菌适配体2序列为5’-AAAAAAAAAAAAAGTAATGCCCGGTAGTTATTCAAAGATGAGTAGGAAAAGA-3’。
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