[发明专利]一种白牛筋木的组培增殖方法

说明书

本发明公开了一种白牛筋木的组培增殖方法，具体步骤包括外植体的选取、外植体的灭菌、无菌系建立和继代增殖；外植体的选取是在3月至5月的晴好天气，剪取牛筋条当年生营养枝的幼嫩茎段或茎尖；外植体的灭菌是剪去嫩茎上的叶片，用洗洁精清洗茎段或茎尖，再用自来水冲洗干净，将茎段或茎尖放入超净工作台中，用75%的酒精浸泡30s，再用灭过菌蒸馏水将酒精冲洗干净，再放入0.1%的升汞溶液中浸泡20‑30min，然后用无菌水清洗4次。本发明采用组织培养增殖方法，为大批量育苗，降低育苗成本，提高育苗效率奠定基础。

技术领域

本发明涉及一种树木的增殖方法，具体是一种白牛筋木的组培增殖方法。

背景技术

牛筋条在植物分类上属于蔷薇科牛筋条属，产于云南的只有一种和一个变种。云南省农业科学院园艺作物研究所结合云南山高坡陡、冬春干旱的实际，就地取材，在总结群众经验的基础上，对牛筋条植物进行了研究。根据初步观察，牛筋条无论嫁接苹果和梨都有矮化树体和提早结果的明显效果，可以一砧多用，是一个很有希望的苹果和梨的实生矮化砧。但牛筋条是常绿灌木，四季常绿，主根发达，入土很深，须根少，有抗早耐瘠的一面，又有不耐移栽、定植的一面，一般嫁接苗由于须根少，移苗定植后缓苗期长，影响生长。

白牛筋木的繁殖方法主要是种籽繁殖和扦插繁殖。种籽繁殖的实生苗因为主根发达，入土深，须根少，又是常绿树，所以移栽成活率低；扦插繁殖，除了要求外界具有一定的湿度、温度、空气和自生以及外界具备充足营养物质外，还需要一些微量的特殊活性物质，操作复杂，由于牛筋条扦插生根困难，育苗成本高，效率低，影响了其推广速度。

发明内容

本发明的目的在于提供一种提高育苗效率、降低育苗成本的白牛筋木的组培增殖方法，以解决上述背景技术中提出的问题。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

一种白牛筋木的组培增殖方法，具体步骤如下：

（1）外植体的选取：在3月至5月的晴好天气，剪取牛筋条当年生营养枝的幼嫩茎段或茎尖；

（2）外植体的灭菌：剪去嫩茎上的叶片，用洗洁精清洗茎段或茎尖，再用自来水冲洗干净，将茎段或茎尖放入超净工作台中，用75%的酒精浸泡30s，再用灭过菌蒸馏水将酒精冲洗干净，再放入0.1%的升汞溶液中浸泡20-30min，然后用无菌水清洗4次；

（3）无菌系建立：无菌系的建立采用的基本培养基是MS培养基，使用的激素为6BA和NAA，将培养基装入广口瓶中，每瓶装入培养基30-40ML，密封后进行高温高压灭菌，灭菌后冷却待用；在超净工作台中，将消毒好的茎段或茎尖剪成长为2cm的茎段，然后将剪好的茎段插入灭菌后的MS培养基中，每瓶培养基插入茎段5-8个，密封后将其放入培养室进行培养；

（4）继代增殖：牛筋条在经过一段时间的培养后，无菌系建立，继而进行继代增殖培养；代培养所用培养基为MS+1-2mg6BA+0.05-0.5%NAA，每瓶培养基为50ML，接入无菌系的茎段3个，密封后放入培养室进行继代培养，每周对培养室进行消毒一定，每20-25d更换一次培养基，通过一个周期的继代培养，牛筋条增殖系数达到13-15。

作为本发明进一步的方案：所述步骤（1）中的茎段或茎尖用质量百分浓度为75%的酒精消毒30秒，再用质量百分浓度为0.1%的升汞消毒25min。

作为本发明再进一步的方案：所述步骤（3）和步骤（4）中的培养室条件为：培养室温度控制在25-27℃，每天光照12h，光照强度为1000-1200Lx。

与现有技术相比，本发明的有益效果是：

本发明采用组织培养增殖方法，对白牛筋木矮化砧木进行大批量生产，降低了育苗成本，提高了育苗效率。

具体实施方式