[发明专利]一种白牛筋木的组培增殖方法有效
申请号: | 201710241937.1 | 申请日: | 2017-04-14 |
公开(公告)号: | CN106857265B | 公开(公告)日: | 2019-05-10 |
发明(设计)人: | 李坤明;陈伟;陈瑶;胡忠荣;万萌 | 申请(专利权)人: | 云南省农业科学院园艺作物研究所 |
主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00 |
代理公司: | 北京中济纬天专利代理有限公司 11429 | 代理人: | 杨乐 |
地址: | 650201 云南*** | 国省代码: | 云南;53 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 牛筋 增殖 方法 | ||
1.一种白牛筋木的组培增殖方法,其特征在于,具体步骤如下:
(1)外植体的选取:在3月至5月的晴好天气,剪取白牛筋木当年生营养枝的幼嫩茎段;
(2)外植体的灭菌:剪去嫩茎上的叶片,用洗洁精清洗茎段,再用自来水冲洗干净,将茎段放入超净工作台中,用75%的酒精浸泡30s,再用灭过菌蒸馏水将酒精冲洗干净,再放入0.1%的升汞溶液中浸泡20-30min,然后用无菌水清洗4次;
(3)无菌系建立:无菌系的建立采用的基本培养基是MS培养基,使用的激素为6BA和NAA,将培养基装入广口瓶中,每瓶装入培养基30-40ml,密封后进行高温高压灭菌,灭菌后冷却待用;在超净工作台中,将消毒好的茎段剪成长为2cm,然后将剪好的茎段插入灭菌后的培养基中,每瓶培养基插入茎段5-8个,密封后将其放入培养室进行培养;
(4)继代增殖:白牛筋木在经过一段时间的培养后,无菌系建立,继而进行继代增殖培养;继代培养所用培养基为MS+1-2mg/L6BA+0.05-0.5%NAA,每瓶培养基为50ml,接入无菌系的茎段3个,密封后放入培养室进行继代培养,每周对培养室进行消毒一次,每20-25d更换一次培养基,通过一个周期的继代培养,白牛筋木增殖系数达到13-15。
2.根据权利要求1所述的白牛筋木的组培增殖方法,其特征在于,所述步骤(1)中的茎段用质量百分浓度为75%的酒精消毒30s,再用质量百分浓度为0.1%的升汞消毒25min。
3.根据权利要求1所述的白牛筋木的组培增殖方法,其特征在于,所述步骤(3)和步骤(4)中的培养室条件为:培养室温度控制在25-27℃,每天光照12h,光照强度为1000-1200Lx。
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