[发明专利]一种羧肽酶A固定化酶的制备方法有效
| 申请号： | 201710231083.9 | 申请日： | 2017-04-11 |
| 公开（公告）号： | CN107058278B | 公开（公告）日： | 2020-06-05 |
| 发明（设计）人： | 熊科;李秀婷;支慧伟;高思宇;熊苏玥 | 申请（专利权）人： | 北京工商大学 |
| 主分类号： | C12N11/082 | 分类号： | C12N11/082;C12N9/48 |
| 代理公司： | 济南泉城专利商标事务所 37218 | 代理人： | 李桂存 |
| 地址： | 100048 北京*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 羧肽酶 固定 制备 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种羧肽酶固定化方法，其特征在于，包括如下步骤：
（1）酒精浸泡活化的AB-8树脂作为固定化材料；
（2）将（1）中活化的AB-8树脂加入磷酸缓冲液，调pH为6.0至8.0，在一定温度条件下，将酶与AB-8树脂进行吸附；
（3）将吸附酶后的载体在一定温度下采用戊二醛交联；
（4）将（2）中所得的固定化酶冷冻干燥后即可；
所述羧肽酶为黑曲霉羧肽酶A；
步骤（2）中酶与AB-8树脂进行吸附的温度为25~45 ℃；吸附时间为12~18 h；
步骤（3）中酶与AB-8树脂进行交联的戊二醛浓度为0.35 %。
2.根据权利要求1所述方法，其特征在于，步骤（2）中活化的AB-8树脂加入的磷酸缓冲液体系，pH为7.5。
3.根据权利要求1所述方法，其特征在于，步骤（3）中酶与AB-8树脂进行交联的交联时间1~6 h、交联温度为4~37 ℃。
4.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述羧肽酶A生产菌为大肠杆菌基因工程菌。
5.根据权利要求1-4任意一项方法制备的酶制剂。
6.根据权利要求5所述的酶制剂，其特征在于，所述酶制剂的最适pH为3.5~11.0，最适温度25~80 ℃。
7.根据权利要求5所述的酶制剂，其特征在于，所述酶制剂的最适pH为6.0~8.0，最适温度35~45 ℃。
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